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常用的电泳缓冲液

   2005-11-18 773
核心提示:缓冲液使用液浓贮存液(每升)tris-乙酸(tae)1×:0.04mol/l tris-乙酸50×:242g tris碱 0.001mol/l edta57.1ml冰乙酸  10

缓冲液

使用液

浓贮存液(每升)

tris-乙酸(tae)

1×:0.04mol/l tris-乙酸

50×:242g tris碱

 

0.001mol/l edta

57.1ml冰乙酸

  

100ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

tris-磷酸(tpe)

1×:0.09mol/l tris-磷酸

10×:10g tris碱

 

0.002mol/l edta

15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

  

40ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

tris-硼酸(tbe)a

0.5×0.045mol/l tris-硼酸

5×:54g tris碱

 

0.001mol/l edta

27.5硼酸

  

20ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

碱性缓冲液b

1×:50mmol/l naoh

1×:5ml 10mol/l naoh

 

1mmol/l edta

2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0)

tris-甘氨酸c

1×:25mmol/l tris

5×:15.1g tris

 

250mmol/l 甘氨酸

94g 苷氨酸(电泳级)(ph8.3)

 

0.1% sds

50ml 10% sds(电泳级)

说明:

①tbe溶液长时间存放后会形成沉淀物,为避免这一问题,可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液,出现沉淀后则予以废弃。

以片都以1×tbe作为使用液(即1:5稀释浓贮液)进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1:10稀释的贮存液作为使用液。

进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小, 故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用1×tbe以提供足够的缓冲容量。

②碱性电泳缓冲液应现用现配。

③tris-甘氨酸缓冲液用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳。

2×sds凝胶加样缓冲液:

100mmol/l tris·hcl(6.8)

200mmol/l二硫苏糖醇(dtt)

4%sds(电泳级)

0.2%溴酚蓝

20%甘油

不含dtt的2×sds凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取1mol/l贮存液现加于上述缓冲液中。



 
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