缓冲液 | 使用液 | 浓贮存液(每升) |
tris-乙酸(tae) | 1×:0.04mol/l tris-乙酸 | 50×:242g tris碱 |
0.001mol/l edta | 57.1ml冰乙酸 | |
100ml 0.5mol/l edta(ph8.0) | ||
tris-磷酸(tpe) | 1×:0.09mol/l tris-磷酸 | 10×:10g tris碱 |
0.002mol/l edta | 15.5ml85%磷酸(1.679g/ml) | |
40ml 0.5mol/l edta(ph8.0) | ||
tris-硼酸(tbe)a | 0.5×0.045mol/l tris-硼酸 | 5×:54g tris碱 |
0.001mol/l edta | 27.5硼酸 | |
20ml 0.5mol/l edta(ph8.0) | ||
碱性缓冲液b | 1×:50mmol/l naoh | 1×:5ml 10mol/l naoh |
1mmol/l edta | 2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0) | |
tris-甘氨酸c | 1×:25mmol/l tris | 5×:15.1g tris |
250mmol/l 甘氨酸 | 94g 苷氨酸(电泳级)(ph8.3) | |
0.1% sds | 50ml 10% sds(电泳级) |
说明:
①tbe溶液长时间存放后会形成沉淀物,为避免这一问题,可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液,出现沉淀后则予以废弃。
以片都以1×tbe作为使用液(即1:5稀释浓贮液)进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1:10稀释的贮存液作为使用液。
进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小, 故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用1×tbe以提供足够的缓冲容量。
②碱性电泳缓冲液应现用现配。
③tris-甘氨酸缓冲液用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2×sds凝胶加样缓冲液:
100mmol/l tris·hcl(6.8)
200mmol/l二硫苏糖醇(dtt)
4%sds(电泳级)
0.2%溴酚蓝
20%甘油
不含dtt的2×sds凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取1mol/l贮存液现加于上述缓冲液中。