地高辛配基随机标记DNA探针试剂盒成份

1．无标记对照DNA1　此管内有20μl pBR328 DNA100μg/ml,pBR328分别用BamHⅠ,BglⅠt HinfⅠ消化，它们的混合比例为2：3：3，共有16个Pbr328片段，这些片段的大小分别为：4907，2176，1766，1230，1033，653，517，453，298，234，234，220和154×2bp。
　　2．无标记对照DNA2　此管内有20μl pBR328 DNA200μg/ml，已用EcoRⅠ线性化。
　　3．DNA稀释缓冲液　有两管，每管1ml[成分为：Tris-HCl(10mmol/L),EDTA(1mmol/L),pH8.0(20℃)]内含鲑鱼精DNA（50μg/ml）。
　　4．标记对照DNA　此管内有50μl线性化pBR328DNA，按标记方法已标记有地高辛配基dUTP,含20μg模板DNA，每毫升含5μg合成的标记DNA。
　　5．六聚核苷酸混合物
　　6．标记用混合底物　此管内有50μl 10倍浓度的dNTP标记用混合底物，含dATP（1mmol/L）dCTP(1mmol/L),dGTP(1mmol/L),dTTP(0.65mmol/L)和Dig-dUTP(0.35mmol/L),pH6.5(20℃)。
　　7．DNA聚合酶Ⅰ大片段（标记级）　此管内有25μl DNA聚合酶Ⅰ大片段（Klenow），2U/μl。
　　8．（Dig）AP结合物　此管内有200μl多克隆羊抗地高辛配基Fab-片段，结合有碱性磷酸酶750U/ml。
　　9．NBT　有两管，每管1.25ml，是溶于70%（V/V）二甲基甲酰胺的硝基蓝四唑盐溶液（75mg/ml）。
　　10．X-磷酸盐　有两管，每管0.9ml，是溶于二甲基甲酰胺的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐的甲苯胺溶液（50mg/ml）。
　　11．封阻试剂　有两瓶，每瓶有50g粉剂。