具体步骤如下:
1.激发光源:使用激光或LED等光源产生单一或多种波长的光。这些光将通过光束整形系统,使其获得理想的光束形状。
2.样品注射:样品通常被稀释并加入试剂,以保证细胞在流动时不会黏连在一起。样品通过注射器被注入到装有缓冲液的注射器中,并通过压力控制一定的流速。
3.水平排列:通过加速流体以及流体的层流自动调整,使细胞在流动时保持单个、水平排列的状态,方便激发光的入射和测量。
4.激发和测量:选择特定的滤光片、光栅和透镜组合来引导激发光通过细胞,并测量光的散射、发射、吸收等特性。激发光在细胞表面相互作用并发生散射或激发产生荧光。根据光的强度、散射角度、发射光的波长等参数,可以推断细胞的大小、形状、颜色等信息。
5.数据处理:收集到的数据将被发送到计算机进行处理。计算机根据设定的阈值和标准,对细胞进行计数、分类和分析。各种特征数据可以通过软件进行可视化显示和输出。
高通量细胞计数仪的应用:
1.细胞培养过程中,监测细胞的生长情况和浓度变化。
2.通过细胞计数,可以估算细胞的增殖速度、存活率以及死亡率等。
3.评估药物对细胞的影响,如细胞毒性测试、细胞增殖抑制实验等。
4.临床样本的细胞计数和鉴定,如血液检测、尿液分析等。
5.评估病菌或微生物的浓度,以判断生物实验室环境的安全状况。
6.也可以用于测量植物细胞的数量以及相关参数,如细胞体积等。
总的来说,高通量细胞计数仪在生命科学的研究和实验中有着广泛的应用,可以快速、准确地计数大量细胞,并为研究提供可靠的数据基础。