| 一、目的要求 |
| 1、了解电子捕获检测器（ECD）的检测原理和使用方法。 2、掌握农药残留量的测定方法。 |
| 二、基本原理 |
| ECD是一种选择性检测器，对含X、S、P、N、O电负性强的物质，影响很大，而对非电负性物质，则影响很小。 放射源（3H或63Ni）产生的B射线将载气N2电离成正离子和电子，这些离子和电子在电场作用下形成“基流”。当电负 性样品进入检测器后，便捕获自由电子，形成的负离子和载气的正离子结合为中性分子，以使基流下降，产生对应的 负信号——倒峰。在一定范围内，检测器的响应信号和样品组分的浓度成正比。 六六六、DDT是目前用量叫大的有机农药，其化学性质稳定，施用后残留在大气、土壤、水体、植物中不易消失，对 人体健康不利。 本法利用己烷提取样品，采用0.23%OV-17和2.8%OV-210混合固体液分离，ECD检测器，外标法定量。 |
| 三、仪器与试剂 |
| 仪器：气相色谱仪，ECD；离心机；布氏漏斗；0.5*22cm玻璃层析柱；1000ml分液漏斗2只 试剂：无水硫酸钠、硫酸钠、己烷、丙酮、浓硫酸(均为AR)；硅藻土(30—30目)、OV—17、OV—210(色谱级)、 Chromosorb WAW—DMCS；α-666、β-666、γ—666、δ—666、p，p＇—DDE、o，p一DDT、p，p＇一DDD，p，p＇ —DDT。? |
| 四、实验步骤 |
| 1．色谱条件： Φ3mm×2m玻璃柱，固定相：o．23％OV—17+2．8％OV—210，Chromosorb?? W，AW一DMGS，80~100目 ；Tc=200℃，TD=210℃，Ti=230℃；载气：N2? (99．99％)，60~70ml／min ；放大器高阻108Ω脉冲间隔50μs。 2．试样的提取和净化： 将洗净后的蔬菜或水果切碎，并充分混合称取l00g样品放入捣碎缸中，加己烷200ml，丙围50ml，快速捣碎2min。 将浆液倒入500m1离心怀中，用少许蒸馏水冲洗捣碎缸并入离心杯，在3000r／min的离心机中，离心15min，离心液用 布式漏斗过滤，用己烷冲洗离心怀，并经布式漏斗过滤，滤液倒入1000mI分液漏斗使其分层。 将水层分到第二个1000m1分液漏斗中。己烷层用500m12％硫酸钠振摇1min，使其静止分层。再将水层并入第二个分 液漏斗中，加50mI己烷轻轻摇2min，静止弃去水层。最后将两个分液漏斗中的己烷提取液都通过装有无水硫酸钠的简形 漏斗，滤入250m1三角瓶中。提取液在水浴上浓缩到20一30mI左右，用己烷定容到50ml。 从50mI容量瓶中吸出5mI提取液在氮气流中浓缩到1m1后倒入层析柱中净化。层析柱为0.5cm×22cm玻璃管，内装硅 藻土(1g硅藻土滴加0.6mI的浓硫酸混和)，柱的底部放一段经己烷洗涤过的破璃棉，硅藻土层的顶端放入少许无水硫酸 钠。洗涤浓缩器的己烷也倒入层析柱中，然后用己烷冲洗柱，用25m1容量瓶收集。?? 自25m1容量瓶中吸取一定体积的净化溶液，经浓缩即可进样分析。 3．仪器调试： (1) 将载气调至需要量，接通主机电源； (2) 先升检测器温度，再升汽化室温度和柱温； 打开微电流放大器“电源”开关和放大器开先，灵敏度高阻 为108Ω，衰减调到适当位置，“基补”-“零调”开关放在‘基补”上； (３) 打开“脉冲电源”开头，“μs选择”调到50μs； (４) 打开记录仪电源和记录笔开关，调“基补”电位器，把记录笔调到0.8一0.95位置。 (５) 检查基流时，“脉冲电源”开关处于关位置，记录笔指针向零点方向移动(否则应改变“正”“负”开关位置)， 指针移动量应在记录仪量程范围6内，但不应小于0.1mV； (６) 各恒温器稳定后，就可进样分析。 4．标准溶液配制： 用己烷配制“α—666、β—666、γ—666、δ—666、p，p＇—DDE、o，p一DDT、p，p＇一DDD，p，p＇—DDT各 为l00ppm(β—666要先用少量蒸苯溶解)的贮备液。 操作溶液浓度与样品浓度相近。 5．色谱测定： (1)用各种浓度的六六六、DDT标准溶液注入色谱仪，以确定ECD的线性范围； (2)进样品溶液，根据样品的峰高，用标准贮备液配制浓度相近的操作溶液； (3)在相同色谱条件下，依次进样品和标样，记录tR和色谱图。 |
| 五、数据处理 |
| 根据色谱图测量蜂高，计算蔬菜和水果中的六六六、DDT的含量。 ci? ／ hs*Wi*K(mg/kg)=hi*cs*Ws? 式中： ci——样品中农药的浓度； hi——扣除试剂空白后的峰高； Ws—一标准溶液进样邑； Wi——样品溶液进样量； hs——标准溶液峰高； cs——标准溶液的浓度(mg／kg )， K——浓缩系数 |
| 六、问题讨论 |
| 1．脉冲间隔对测定有何影响？如何选择？ 2．如何防止ECD的污染？ 3．所用的注射器和玻璃器皿为什么不能用丙酮、氯仿等洗涤？ 4．测定时为什么要先确定ECD的线性范围？ |
| 七、注意事项 |
| 1.使用ECD时应采用高纯度载气，并经净化处理。 2．新装填的色谱柱必须在高于使用温度的条件下充分老化，未老化好绝对不得与ECD相连。 3．使用ECD时，如短时间停机，不要关闭载气，只将载气流速降低。 4．所用的注射器、玻璃仪器等，必须用烃类溶剂充分洗净，绝对不能用丙酮、氯仿等洗涤。 5．萃取中出现乳化现象时，可采用冰冻、离心、吸滤等方法破乳化。有机相中水较多时可加少许无水硫酸钠脱水。 |
