 | 3M霉菌和酵母菌检验测试片操作以及判读 |
| 一、测试霉菌和酵母菌 操作方法 | |
 1、未开封时，冷藏于≤8℃（≤46℉），并在保存期内用完，高温度时，凝固水可以排除，包装物最好于室温启开。 |  2、已开封的，将封口以胶带封紧。 |
 3、保存再封的袋于≤25℃（≤77℉）和温度<50％，不要冷藏已开启的包装袋，并于一个月内使用完。 |  4、制备1：10和更大稀释的食物样品稀释液，称取或吸取食物样品，置入适宜的无菌容器内，如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag或者其他灭菌容器内。 |
 5、加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的旦白胶水(ISO方法6887) 、缓冲旦白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水。不可使用含有枸橼酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液，因为它们能抑止菌生长。 |
样品不需要调PH，但已调解PH的样品也能够使用。 |
 7、将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。 |  8、使用吸管将1ml样液垂直滴加在测试片的中央处。 |
 9、允许使上层膜直接落下,切勿向下滚动上层膜. | 10、手拿压板横膜,将压板放置在上层膜中央处. |
 11、平稳的压下，使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上，切勿扭转压板。 |  12、拿起压板，静置至少1分钟以使培养基凝固。 |
 13、测试片的透明面朝上，可堆叠至20片，于21-25℃（70-77℉）培养3-5天。大的或快速生长的霉菌在培养5天后会呈现含混模糊的菌落，应在培养3天后记录高数量计数结果。 如果培养5天后，测试片上菌落丛生过快的生长，则以3天计数结果作为估计菌落数。培养时间和温度因方法而有不同，最通用的认可方法是： AOAC官方方法997.02 （食品类） 21-25℃培养5天。 |  14、可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计数，并可参考判读卡计算菌落数。 |
| 二、测试霉菌和酵母菌 判读方法 | |
| Petrifilm and Mold count MoldTM测试片为预先制备好的培养基系统,它含有一种冷水可溶性的凝胶剂，营养基和一种指示染剂，可提供对比，利于菌落计数。 | |
 Yeasr count=44图1为酵母菌菌落特征： 小型菌落 菌落有明显的边缘 菌落为灰白色到兰绿色,也可呈粉色 菌落有隆起 菌落颜色均匀一致,没有暗色中心 |  Mold count=27图2为酶菌菌落特征： 小型菌落 大型菌落 菌落有扩散的边缘 菌落有不同的颜色(以霉菌产生不同色素而定)如棕色.米色.橙色.和兰绿色等. 菌落扁平 通常菌落中心颜色深暗 |
 Years and mold count=0图3所示在PYM测试片上没有霉菌和酵母菌菌落. |  Yeast count=12Mold count=4 图4所示在PYM测试片上有少数量的霉菌和酵母菌菌落. |
 Estimated yeast count=480Mold count=21 圆形的生长区大约为30cm2,当菌落数超过150个为估计菌落数,可选择其中一个或几个有代表性菌落的小方格(1cm2 ),计算平均菌落数在乘以30,可得到整个测试片上的估计菌落数. |  Yeast count=TNTC (实际菌数>104)图6所示在PYM测试片边缘框里光亮区的的小型.兰色菌落同样也分布在整个测试片中(尽管有较小的可见度),这是胶木菌菌落太多无法计数(TNTC)现象. |
 Mold count=59图7所示,在测试片上霉菌菌落出现堆挤和彼此覆盖,为了方便计数,可将测试片分成几个区域,计算每个有明显暗色中心的菌落.所划的方形区内有15个霉菌菌落。 |  Mold count=TNTC 图8a和图8b为同一样品的测试结果.图8a为1:10样品稀释液,菌落小、虚弱暗淡、数量多、计数困难。图8b为1：100样品稀释液，生长菌落数在适宜范围（15-150个）内，很容易计数。 |
 Yesat and Mold Count=0 |  yesat and Mold Count=0 |
6、搅拌或均质样品.
