移液枪的分类和工作原理
气体活塞式移液枪
工作原理:通过弹簧的伸缩运动,推动活塞,排除部分空气,利用大气压吸入液体,再由活塞推动空气排除液体。
塞式移液枪
工作原理:通过分液管或吸头内活塞的连续运动移取和打出液体,活塞和液体直接接触,没有空气柱,适用于密度、黏度与水不同的液体,如易挥发性溶液、粘稠液体等。
移液枪使用诀窍
气体活塞式移液枪
1影响移液枪精度因素
(1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差。
(2)气密性:吸头和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差。
(3)吸速:容易造成吸头内气泡产生,而且会污染枪头。
(4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差。解决办法:反复抽吸4-5次就可改善。
2具体使用方法
更换tip法:最精确。
(1)调节旋钮到所需刻度位置,诀窍:首先可略超过一些,再回旋至刻度。注意禁止超过最大刻度,避免人为误差。
(2)插上tip:无菌操作时,要注意动作迅速正确,不能用手碰tip,动作的力度要保持一致,禁止废动作。普通操作时,可用拇指食指上紧,但手不能碰tip尖端处。
(3)指压到第一段,tip尖端接触试剂。白色tip进到液面1 mm一下,黄色吸头 2-3 mm,蓝色吸头2-4 mm,避免液压的影响造成的误差。
(4)缓慢吸试剂,禁止速度过快,液体进入枪头。
(5)移出吸头后,先在容器内壁轻轻靠住,使吸头外壁液体流下。
(6)将吸头贴在目标容器内壁,轻轻按到第一段,压出液体。
(7)吸头尖端在容器内壁略上滑动,保留尖端少量液体,移出目标容器,手指卸掉吸头,注意不要使试剂溅出。
一只吸头分注法:不适用于挥发性,有毒性试剂。
(1)同上述A-D,移出液面后,先缓慢按到第一段,在用力按到第二段,将试剂全压出。
(2)同上述C,缓慢吸出液体。
(3)在目标容器液体上空,压出试剂到第二段,注意压的力度要和A相同,还应注意试剂不要四处飞溅。
(4)缓慢返回第一段,可重复上述操作。达到目标容器原有液体不污染吸头的目的。
转移数ul的贵重试剂时的方法:
(1)同上述A-D,移出液面后,在容器内壁轻按几下,使外壁液体流下。白色吸头进到液面1 mm以下,这最重要。
(2)tip尖端浸入目标容器的液面下,缓慢压到第一段。
(3)松开,返回到第一段,重新吸入液体,反复4-5次,,洗净吸头内壁液体。
(4)将吸头尖端移出液面,在内壁轻轻靠住,压出液体到第二段。
移液枪使用注意事项,要注意以下几点:
1. 正确选择移液枪与吸头组合量程
空气柱的体积越小,误差越低。
2. 吸头的浸没深度
吸头尽量浸没得浅一些,防止液体残留在吸头表面,但是同时要浸没得足够深防止吸取空气。
3. 垂直吸取液体
移液时角度不同,液体压力也会改变。
4. 预润湿
通过预润湿,使得空气柱充满饱和的液体分子,至少预润湿3次,使得空气柱里的液体分子达到饱和。
5. 正确的放液操作
放液时,吸头尖靠在容器内壁,完全打出,排出最后的液滴;体积低于10ul直接放液到容器底部。
6. 缓慢、匀速的吸放液体,保证结果的精确性。
移液六部曲
1. 装吸头
移液器套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。
错误操作:用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。
2. 量程设定
操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10-100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35-100%量程范围内操作。
量程调节:当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。
3. 润洗
用同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。
注意:高温或者低温液体请不要润洗!
4. 吸头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20°。
5. 吸头浸入深度:0.1-10ul:1-2mm、10-200ul:2-3mm、200-2000ul:3-6mm、over2000ul:6-10mm。
6. 吸头浸入时间
吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。
7. 吸液速度
匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。
排液四种方式:沿内壁、在液面以上、在液体表面、液面下。
9. 手温
移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。
移液枪的维护保养
一
密封性检查
1.仪器测漏
2.简单目测法
1)200uL及以下的移液器,吸液后将吸头浸入液面1-2mm,静待20秒,观察吸头内部液面是否下降。
2)1000uL以上的移液器,吸液后将吸头移出液面,朝下垂直静置15-20秒,观察是否有液体下滴。
二
移液器的清洗方式
外部清洁:
日常清洁剂(专业清洗剂,肥皂液,洗洁精等)擦洗,然后用纯水淋洗,晾干即可 。
内部清洁:
1)下半部分拆卸下来。
2)塑料部件(套柄等)采用与外部清洁一致的方式即可。
3)活塞清洁可用纯水(或先用异丙醇冲洗再用纯水洗净),晾干, 然后在活塞表面用棉签涂上一层薄薄的硅酮油脂。
注:移液器主体密封部分,大多是免维护的,不能轻易拆卸。
二
移液器的故障分析解决
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
吸头漏液或分液体积不准确 | 吸头松脱或吸头不匹配 | 插紧吸头;更换匹配的吸头 |
移取粘稠、易挥发性或与水密度有明显差异的液体 | 预润湿吸头数次 | |
移液过快 | 缓慢移动控制按钮,慢吸慢放 | |
吸头离开液面过快 | 在液面下停留3秒钟,再缓慢移出吸头 | |
活塞被污染或损坏 | 清洁或更换活塞 | |
移液枪吸嘴损坏 | 更换移液枪下半部分零件或通道 | |
控制按钮移动困难,发涩。 | 活塞被污染 密封圈污染 移液枪堵塞 | 清洁移液枪下半部分 更换过滤芯 |
安装吸头时吸嘴无弹性伸缩 | 锁定环取消了弹簧加载 | 取下锁定环 |
文章(文字)来源:网络