测试片法介绍
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方法原理及操作
测试片主要由培养基、冷水可凝胶、显色剂组成,菌落总数大多数用的显色剂是TTC。细菌在测试片上生长时,细胞代谢产物与浓度极低的指示剂TTC发生氧化还原反应,将指示剂还原成红色产物,从而使细菌着色。所以,大多数测试片上红色菌落判断为菌落总数。
操作流程:在无菌条件下,吸取1mL待检样品滴加到测试纸片中, 覆盖好纸片放置 36 °C±1 °C培养 48 h±2h(有快速测试片为24h±2h)。
计数全部红色菌落为菌落总数(但也有双显色剂的测试片)。
02
适用范围
由于操作简单,被广泛使用于加工过程菌落总数快速测定。适用于大部分食品及环境涂抹样本,试用范围较广泛。
颜色较深样品可能会有干扰,部分辛辣调味料会有干扰抑制,可选用特殊的样品处理方式,如选择合适的稀释倍数或带滤网的均质袋进行样品处理,具体依据各厂家的技术声明来执行。
03
主要方法特点
操作简单,节省人工。减少了培养基准备工作, 节省了大量的人力物力。
平板菌落结果一致性好,避免了热损伤菌落蔓延发生减少。
判读更清晰,易与食品颗粒分开。
节省培养空间。检测同样数量的样品,使用测试片所占的空间比平板要少很多,大大节省培养空间。
安全性高,不易碎、不会对人员造成潜在的伤害,另密封比较好,不容易直接接触菌落。
04
常见问题
(1)出现菌落蔓延、水化现象
主要由食品中的芽孢杆菌引起的易产生液化的产品:冰淇淋、糕点、加工肉制品、调味料等。可以减少堆叠数量或者进一步稀释来缓解。
(2)TTC具有一定抑菌功能,测试片以TTC为指示剂是否有影响?
首先,测试片生产时添加的是极低浓度的TTC,低浓度的TTC对多数常见微生物是不造成抑制的;其次,多数测试片的工艺采取的是分层涂布,TTC位于最上层,菌体长出来后才能接触到低浓度TTC。
(3)有些样品,低稀释度菌不生长,高稀释度菌生长,如含有防腐剂、抑菌剂等具有一定抑制作用的样本;含有乳酸菌较多的样本;pH值较低的样本。
可以通过稀释梯度来解决。
(4)开封后测试片的保存方法及原因?
密封夹密封后,常温/冷藏、避光、干燥保存,并于1个月内使用完。如果从冰箱中取出后要常温放置一段时间再打开使用以防止冷凝水的产生。
(5)测试片是否容易导致污染?
首先,测试片是预制的无菌培养基系统;其次,测试片的接种操作时间短,只要遵循无菌操作,其污染的几率相对传统方法更小;且培养过程中,测试片的接种生长区域处于密封状态,不会导致污染。