| ELISA检测试剂盒使用指南 |
| 步骤 | 常见问题 | 解决方案 |
| 实验准备 | 1 加样器不准确；尤其10ul以下的加样器，对结果影响极大； | 1 校正加样器；10ul以下加样器最好采用进口产品（芬兰、法国等）； |
| 2 保温设备不良； | 2 仔细校正温度到37℃，水浴箱为佳； |
| 3 洗涤用水不规范。 | 3 必须使用去离子水或蒸馏水，不得用自来水、矿泉水等。 |
| | 4 认真阅读使用说明书。 |
| 样品加样 | 1 加样不准确； | 1 加样时一定要仔细。加样后，再检查，以防漏加、错加。 |
| 2 没有混匀。 | 2 加样后，反复抽吸3次混匀，防止血清聚集孔底，导致非特异性吸附。 |
| 洗涤 | 洗涤不彻底 | 1 每次注水洗涤，应静止30秒钟； |
| 2 选用吸水纸作为衬垫，每次洗涤后扣干孔内水分； |
| 3 可选用塑料洗涤瓶。 |
| 加酶反应 | 漏加 | 滴加后，认真检查各孔 |
| 结果判断 | 1 包括阴性对照孔在内，各孔显色普遍偏深； | 1 可能是洗涤不充分；加样过量；温育时间过长温度过高；按说明书重新操作。如无改善，可与生产厂家联系； |
| 2 包括阳性对照在内，各孔均无显色； | 2 可能是漏加样本或酶液；温育时间过短温度过低；试剂保存不当活性下降；按说明书重新操作。如无改善，可与生产厂家联系； |
| 3 阳性对照不显色，而其它样本显色正常； | 3 阳性对照漏加、错加或失效。重新操作。如无改善，可与厂家联系，索要对照品； |
| 4 有些标本显色不深，判断阳性困难。 | 4 重新操作。最好使用酶标仪，测定光吸收度，按P/N值标准判断。 |
| 试剂保存 | 保存不规范 | 一定要在2-8℃存放。不得过高，也不得冻存（冻存后，酶液将失效）。 |
| 对照品 | 对照品为冻干品 | 按对照管标示，加入相应体积的去离子水或蒸馏水复溶，充分溶解混匀。可按说明书使用。 |
