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细胞培养过程中细菌污染怎么解决?

   2023-08-01 810
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 细胞株是在模拟体内生理环境等的特定体外条件下进行生长,但又缺乏机体的免疫系统等机制,因此细胞培养工作不仅需要完善的实验设计和技术方法,成败的关键还在于能否保持无菌状态、战胜多种污染源带来的挑战。


细胞株的微生物污染源一般有细菌、真菌、支原体。其中,支原体的大小为 0.1~0.3μm,相比于细菌和真菌在污染细胞培养物后会导致培养基变色且镜下可以观察到菌体,支原体在普通的光学显微镜下不容易被观察到,并且可穿过绝大部分的滤膜,因其没有细胞壁,作用于细胞壁的抗生素对它无效。


细胞株一旦感染支原体后,培养基通常不会有颜色变化。支原体附着在细胞株表面,通过抢夺细胞培养基中的养分实现增殖。在其繁殖的过程中除了消耗培养基中的各种养分,同时还会改变培养基中的pH值,甚至产生对细胞株有毒害的代谢产物,从而导致细胞状态的改变。

实验室培养条下被多种支原体同时污染的情况屡见不鲜,这是一个让大多数实验室都十分头痛的问题。保持无菌状态,无论对于新手亦或是老手,都是一个巨大的挑战。体外培养的细胞缺乏免疫系统,因此,控制污染的方式是预防污染!


在细胞培养过程中,潜在的污染途径主要包括操作技术和环境,其中环境因素又包括了无菌试剂和材料、层流超净工作台、恒温恒湿培养箱、水浴锅和冰箱等。
细胞实验室传统的消毒流程是:1.用消毒酒精擦拭台面;2.打开超净工作台和细胞房的紫外灯,照射1~2h。值得注意的是,紫外灯开启后,人不能进入实验室内,紫外线对眼睛和裸露的皮肤均有危害。若要进入,操作人员一定要先关闭紫外灯,待人离开后再重新打开。

 

相比之下,比林科汉智能化干雾消毒设备操作简单、设备体积小、重量轻,通电后即开即用,随时启停,消毒者可在实验室外可远程控制,完成整个消毒过程,从而避免在正常时间及突发状况下,操作人员为关闭设备而暴露在消毒过程中。面对细胞培养实验室苛刻的设备损耗条件,比林科汉拥有优秀的材料兼容性。对玻璃、不锈钢、环氧树脂等实验室常见材料腐蚀性小,是细胞培养实验室清洁消毒的更好选择!

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