一、用途及原理
该培养基用于乳酸菌的分离培养。
培养基中的蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供细菌生长所需的碳源、氮源、维生素等成分,乙酸钠、吐温80可促进乳酸菌的生长,叠氮化钠对革兰氏阴性菌有一定的抑制作用,硫酸镁、硫酸锰、铁提供微量元素,氯化钠维持渗透压,琼脂为凝固剂,碳酸钙为指示剂,乳酸菌可在此培养基中生长,分解葡萄糖产大量乳酸,使培养基的pH下降,碳酸钙被溶解,菌落周围变透明。
二、培养基配方(g/L)
葡萄糖 | 10.0 |
酵母浸粉 | 10.0 |
蛋白胨 | 5.0 |
牛肉浸粉 | 2.0 |
吐温80 | 0.5 |
乙酸钠 | 2.0 |
叠氮化钠 | 0.01 |
硫酸镁 | 0.2 |
硫酸锰 | 0.01 |
铁 | 0.01 |
氯化钠 | 0.01 |
碳酸钙 | 5.0 |
琼脂 | 12.0 |
pH | 6.8±0.1 |
三、配制方法
称取本品46.74克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷区后倾入无菌平皿,备用。
注:培养基中的碳酸钙不溶于水,溶解后需充分摇匀,使碳酸钙分布均匀,制成的平板应为淡黄色不透明固体。
四、生长现象及结果观察
接种以下质控菌株,在30℃下培养3-7天:
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量/CFU | 回收率 | 生长现象 |
鼠李糖乳杆菌 | ATCC7469 | 20-200 | ≥70% | 白色圆形凸起菌落,周围有透明溶钙环 |
植物乳杆菌 | ATCC8014 | 20-200 | ≥70% | 白色圆形凸起菌落,周围有透明溶钙环 |
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