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如何判断一个培养基的稳定性及进行保存

   2022-08-25 青岛海博生物745
核心提示:在平常的实验中,我们经常会遇到一个情况:配制了200mL培养基,实际上只用了50mL培养基,那剩下的培养基是否能下次使用?或者应该……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
 在平常的实验中,我们经常会遇到一个情况:配制了200mL培养基,实际上只用了50mL培养基,那剩下的培养基是否能下次使用?或者应该保存在什么条件下可下次继续使用?主要从以下两个方面判断:

  (1)污染的可能性。主要考虑使用过程和保存过程综合考量是否有较大的污染可能性,若存在污染风险,不建议继续留用。(注:培养基不可重复灭菌)

  (2)培养基成分的稳定性。根据培养基的组分稳定性,也可大致判断培养基是否易于长时间或短时间储存。

注:严格来讲,培养基的储存条件及时间应由相应的效期试验得出,本文章的方法仅用于大致判断培养基的稳定性。


一、培养基中较稳定成分

  (1)稳定的无机盐(不参与氧化还原反应):如磷酸盐、氯化钠、氯化钾等,对光热不敏感,通常也不与其他成分发生氧化还原反应,在培养基的长期存放过程中不会发生变化。

  (2)琼脂:琼脂在中性常温环境下较为稳定,在培养基中仅做为凝固剂,因此在适宜的保存条件下,琼脂通常也不会发生明显变化。

  注:酸性条件和结冰会破坏琼脂结构,若培养基长期保存过程中未密封,则琼脂会逐渐失水变干。


二、相对稳定的成分

  (1)蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉等营养成分:这些营养成分提供微生物生长所需的碳氮源、维生素等,可耐短时间的高温灭菌,相对较为稳定。但内含的维生素在长时间的高温和见光条件下仍然会逐渐分解,短期内(不超过1个月)的室温保存通常不会有问题,若需要长期保存,应放置阴凉处或冷藏避光保存。

  (2)糖醇苷类:在培养基中主要提供碳源,种类繁多,有一些相对稳定,但在高温灭菌后,会逐渐发生焦化现象,导致培养基pH下降。在培养基含糖量不高于5g/L的情况下,短时间内通常不会有明显变化,若培养基同时含有磷酸盐稳定培养基的pH,则更有利于培养基的长期存放。


三、不稳定成分

  (1)抗生素类:有些抗生素不耐高温,配制时只能过滤除菌,对光和热敏感,但也有一些抗生素非常稳定,如氯霉素、萘啶酮酸等,在高温下不分解。含有抗生素类的培养基通常应保存在2-8℃。

  (2)天然成分:如卵黄、血液、血清等不稳定成分,通常需现配现用,短期保存需放置在2-8℃,不建议长期保存。

  (3)氧化还原性成分:如亚铁离子、半胱氨酸、巯基乙醇酸钠等,易被空气氧化,需密闭保存。

  (4)染料/酸碱指示剂:带颜色的染料通常对光比较敏感,见光易褪色,应注意避光保存。

  (5)不稳定的盐:如亚硒酸氢钠、亚硫酸钠、碳酸氢钠等,易分解或被氧化还原等,含此类成分的培养基应现配现用或冷藏保存。


总结:

  若培养基中的成分相对比较稳定,可在室温短期存储或冷藏长期储存;

  若培养基中含有不稳定成分,应现配现用或在2-8℃短期存储。


注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。



 
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