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华农培养基成分与制法

   2022-03-29 现代微生物培养基和试剂手册587
核心提示:培养基中的胰蛋白䏡为高营养蛋白胨;䏡蛋白胨对保持猪痢疾密螺旋体(Treponema hyodysenteriaeT.h)毒力有一定的作用;胰蛋白胨为酪蛋白胰酶消化物,富含氨基氮,有利于此菌生长;培养基中所加脱纤牛血既可支持生长,又可指示生长菌的溶血性能。所加抗菌素作为抑菌剂,可抑制大多数杂菌的生长而不影响该菌的生长。……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
【原理】
培养基中的胰蛋白为高营养蛋白胨;蛋白胨对保持猪痢疾密螺旋体(Treponema hyodysenteriaeT.h)毒力有一定的作用;胰蛋白胨为酪蛋白胰酶消化物,富含氨基氮,有利于此菌生长;培养基中所加脱纤牛血既可支持生长,又可指示生长菌的溶血性能。所加抗菌素作为抑菌剂,可抑制大多数杂菌的生长而不影响该菌的生长。


【成分】
每升牛肉浸汁中的成分
胰蛋白(tryptose, Oxoid)
10g
胰蛋白胨(tryptone, Oxoid)
5g
蛋白胨(proteose peptone, Oxoid)
5g
503型蛋白胨(武汉肉联厂)
5g
氯化钠
5g
琼脂粉(日本进口分装)
15g
Spactam 粉剂
800mg
(溶于10ml灭菌蒸馏水内)
无菌脱纤牛血
50ml


【制法】
取牛肉浸汁(用鲜牛肉按常法制备,-20℃保存)置温水浴内融化,再悬浮上述各成分(除Spectam和脱纤牛血外)于1000ml牛肉浸汁内,加温溶解,调至pH至7.3±0.5,121℃灭菌15分钟,取出灭菌的上述培养基,置30~40℃的温水浴中不断摇动,使较快均匀降温至50℃左右,再加入 Spectam 溶液及无菌脱纤牛血,迅速混匀后,乘热倾注平皿制成琼脂平皿基,备用。


【用途】
用以分离猪痢疾病密螺旋体和无害密螺旋体(Treponema innocens T.I)。


【注意事项】
1.本培养基用于分离T.I时,用Spactam作抑菌剂,其抑制杂菌效果优于多粘菌素B(Polymyxin B),但分离T.I时,因Spactam对某些T.I株有抑制作用,故改用多粘菌素B ,使用时用灭菌蒸馏水将其配成20000u/ ml,待培养基灭菌后冷至50℃左右,按1%量加入培养基中,使终含量为200u/ml 。
2.本培养基中的胰蛋白胨可用Bacto tryptome(Difco)替代;蛋白胨可用大豆蛋白代替。
3.Spactam粉剂是含50%Spectinomycin(壮观霉素),用量按0.8mg/ml计算。
4.本培养基经接种后,置含有冷钯催化剂“105”和CO2:H2=20:80的厌氧罐中培养。


 
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