（Copure ® 苯并芘检测柱）
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为植物油的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测其中苯并(a)芘的含量。该方法 可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
苯并(a)芘(CAS:50-32-8)。
三、应用范围
本方法适用于植物油中苯并(a)芘的检测的HPLC检测及确证。
四、参考标准
《GB/T 22509-2008动植物油脂苯并(a)芘的测定 反相高效液相色谱法》。
五、实验材料
biocomma ® Copure ®苯并芘检测柱22g/60mL(Cat. No. COBAP6022G)。
六、实验步骤
1、样品提取
准确称取植物油样品0.4 g于15 mL离心管中加入5 mL 正己烷， 涡旋1 min。待净化。
2、SPE柱净化
(1) 活化：苯并芘检测柱使用前用30 mL正己烷活化 。
(2) 上样和洗脱：在苯并芘检测柱上加入待净化样品，收集流出液，然后用40 mL正己烷-二氯甲烷溶液（3:1，
v/v）洗脱，收集流出液，合并流出液。（在上样洗脱的过程中，要注意柱体不能干涸。)
(3) 重新溶解：流出液50 ℃减压蒸馏至近干，加1 mL甲基叔丁基醚定容，过0.45 μm滤膜，待上机测试。
3、HPLC条件
设 备：Waters Alliance 2695
色谱柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5μm)
检测器 ：Waters 2475荧光检测器
流动相：A：乙腈 B：水
洗脱方式：等度洗脱 A:B=88:12
流速：1 mL/min
发射波长：406 nm
激发波长：384 nm
进样体积: 10 μL
七、实验结果
1、0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘添加回收结果
表1 0.05 mg/kg植物油中的苯并(a)芘添加回收结果
2、添加水平为0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘检测的液相色谱图
图1 添加水平为0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘检测的液相色谱图
图1 添加水平为0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘检测的液相色谱图
