免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的生物素，从而对样品起到非常针对性的纯化作用，过柱净化后的样品液可直接用于 UPLC或LC-MS/MS进行分析。 亲和柱与UPLC或 LC-MS/MS配合使用可达到快速测定的目的，以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。
概述
生物素，别名 VB7、VH或辅酶 R，是一种水溶性 B组维 生素，它以羧化酶的辅酶形式微量存在于活细胞中，参与蛋白质、脂肪和糖类的代谢，是动物机体维持正常生理机能所必需的维生素之一。我国在相关标准中规定了婴幼儿配方奶粉与调制乳粉中强化生物素的量。
原理
测定的基础是抗原、抗体反应，抗体连接在柱体内，样品经过离心、脱脂后，缓慢的通过生物素免疫亲和柱，在免疫亲和柱内生物素与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用洗脱液洗脱生物素，然后注入到分析仪器中用于检测。
注意事项
1.使用前，免疫亲和柱需回至室温（22～25°C）。
2.亲和柱 2～8°C储存，不得冻存。
3.不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4.取样量：根据需要可以适当增加或减少取样量，注意提取液 量要相应改变。
5.柱容量：柱容量为 1000ng，根据样品中大致含量，适当调整上样量，乘以相应稀释倍数。例如：奶粉中生物素含量大于2500μg/kg（即未乘以稀释倍数之前的检测结果大于1000μg/L）时，上样量可以降低为 5mL，此时稀释倍数为5。
6.pH：亲和柱的上样溶液 pH需在 6～8之间，若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节 pH。
7.上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。
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