免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素,从而对样品起到非常针对性的净化作用,过柱净化后的样品液可直接用于HPLC分析。 亲和柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。 本亲和柱可用于样品中黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2、M1、M2)的样品提取、净化。
概述
黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、花生、坚果、棉籽、饲料、植物油以及动物组织和血液中。其中黄曲霉毒素B1(AFT B1)的毒性、致癌性、污染频率均居于。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物,也是一种强致癌物质。牛乳及其制品易受到黄曲霉毒素M1污染。
原理
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品中的黄曲霉毒素经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过黄曲霉免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素,然后注入到分析仪器中用于检测。
注意事项
1.使用前,免疫亲和柱需回至室温(22~25°C)。 2.亲和柱2~8°C储存,不得冻存。 3.不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。 4.柱容量:当样本中待检毒素的含量除以稀释倍数高于柱容量时,需要适当降低上样液的体积,重新检测。 5.pH:亲和柱的上样溶液pH需在6~8之间,若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。 6.上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。 7.黄曲霉毒素可致癌,应戴手套口罩等防护工具操作。 8.使用过的容器及黄曲霉毒素溶液用次氯酸钠溶液(5%V/V)浸泡过夜。 9.当奶粉样品不易溶解时,可以在50°C下静置30min。若还不溶解则适当扩大溶解用的水的比例。 10.对于离心之后特别浑浊的样本,可以适当提高离心的转速或者增加离心的时间。
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