标题:细胞培养室如何快速杀灭支原体,保证无菌操作
关键词:细胞株支原体污染;如何快速杀灭支原体病菌;杀灭细胞培养室支原体细胞
细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精氨酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。
各国细胞库支原体污染的统计表,如下:
国家 | 受支原体污染(%) | 报告年度 |
USA-FDA | 15 | 1993(past 30 years) |
USA-ATCC | 15-20 | 1992 |
Japan-(IFO,RIKEN,JCR | 80~30~22 | 1981 1987-1993 1998 |
Germany-DSM | 36 | 1990-1994 |
Argentina | 65 | 1987 |
Israel | 32 | 1986-1993 |
China | 95 | 1990 |
造成支原体高污染率的原因为:
1、支原体size 0.1~0.8 um,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um)
2、支原体污染时,没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化
3、过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式
4、细胞流通间缺乏品管,造成实验室间的相互污染
5、研究或操作人员忽略污染问题
而支原体污染了来源:
1、已受污染的细胞
2、操作人员的疏失
3、已受污染的培养基、血清
4、操作环境不良、实验器具不洁等
支原体的污染是目前细胞实验室比较普遍存在的问题,用药物来杀灭支原体虽是一种重要措施,毕竟是一种补救方法,而且清除后,支原体仍可重新污染细胞。
因此,重要的还在于预防,如何有效杀灭实验室空间支原体病菌,保持细胞培养间洁净和严格无菌操作才是重中之重!
欧菲姆干雾灭菌系统
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【作用原理】 通过向需要灭菌的区域扩散干雾来完成喷雾过程,当液滴的平均直径小于10微米时,喷出雾可以称之为“干”的,小的液滴会从墙面上弹开并且不会破裂使表面潮湿,而所有的条件的建立都是为了满足杀孢子剂以气化的形式有效的移动到指定的区域,这种形式的特性决定了它们可以移动到平时难以到达的区域。
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