构建方法:
信号通路研究工具细胞株现包括反映NAFT、CRE、NFKB等信号分子活性的细胞株,均采用慢病毒系统构建,经单克隆细胞筛选得到的稳定细胞系。稳定转入的基因包括一个由信号分子控制表达的报告基因及筛选稳定细胞株的嘌呤霉素抗性基因(图1)。所有细胞株均经过抗生素初筛、克隆筛选、细胞功能筛选,终得到传代稳定,低本底表达及高反应性的细胞单克隆株。
图1、信号通路细胞株转入表达原件示意图
产品资料:
实例:
1、PMA/Ionomycin刺激NFAT-RE-EGFP细胞株
图2、NFAT-RE-EGFP稳转细胞株功能检测实验结果。细胞用PMA 5ng/ml+Ionomycin 1uM刺激24小时,在荧光显微镜下观测EGFP荧光。
2、PMA/Ionomycin刺激NFAT-RE-Luci细胞株
图3、NFAT-RE-Luci稳转细胞株功能检测实验结果。细胞用PMA 5ng/ml+Ionomycin 1uM刺激6小时,收集细胞裂解后加入萤火虫荧光素酶反应底物,用化学发光成像仪成像。
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