检测步骤1、核酸提取
新鲜培养物：
使用商品化的核酸提取试剂盒或其他验证过的核酸提取方法进行核酸提取。
纯培养菌株：刮取一环纯培养菌落，悬浮于100μL的无菌水中，漩涡震荡10s（如果菌落未能均匀分散，可适当延长震荡时间），95℃或沸水浴5min，冷却至室温，12000rpm离心5min，吸取上清。
2、反应体系配置
从试剂盒中取出BC预混液，充分融化，涡旋后短暂离心，取20μL置于PCR管或PCR板中，然后将阴性对照、样品的DNA提取液、阳性对照各取5μL分别加入PCR管或PCR板中，盖好管盖或板膜，短暂离心，立即进行PCR扩增反应。
3、PCR扩增
PCR管或PCR板置于PCR仪上，推荐反应程序设定如下：反应体系为25μL，在第二步每个循环60℃时检测荧光信号，检测通道选择FAM。
注：使用ABI系列PCR仪器，如果不添加ROX，“passive reference”和 “quencher”均选择“none”。
注意事项1、实验前请仔细阅读说明书，规范操作。2、本品各组成成分均不得与其他产品或不同批号产品中的相应组成成分进行混用。3、基因变异可能会导致假阴性结果。4、实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染都可能会造成假阳性结果。5、恰当处理实验过程中的废弃物和扩增产物。
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