褪黑素主要是哺乳动物和人体的松果体产生的一种胺类激素,具有改善睡眠的效果,但长期服用会导致、生育障碍等不良后果。本试剂盒适用于快速筛查中是否添加褪黑素,适用于监管现场检验和实验室检验。
【检 测 原 理】
根据褪黑素与其它物质化学极性的不同,通过展开剂在硅胶板上展开距离的不同来确定组分存在。
【检 测 步 骤】
1. 样品处理:
取片剂1片,1颗胶囊剂内容物,研细;将研碎粉末全部(或称取0.5克)置于装有褪黑素试剂A的试剂瓶中,充分振荡提取2分钟左右,静置备用。
2. 点样:
取一片硅胶板,在白色涂层面底端向上约1厘米处,用铅笔画一条直线,取两点分别作为样品和参照品的点样点(如图所示)。取1支毛细管,将其下端浸入样品上清液中,停留2秒后取出,与样品点样点垂直接触。点样斑点挥干后,再重复点样一次(斑点直径控制在5毫米以内)。另取毛细管取参照品溶液在参照品点样处进行点样,晾干后备用。
3. 展开:
用吸管取约1mL褪黑素试剂B于50mL提取瓶中,将晾干后的硅胶板(点样端朝下)放入提取瓶中,盖上盖子。待展开剂沿硅胶板向上展开至硅胶板顶端约25px处时(约2~3分钟)取出硅胶板,晾干。在光线暗处,使用254nm紫外灯(如JJ-I型紫外检测仪、灭菌用的紫外灯等)近距离照射硅胶板。
【结 果 判 定】
在紫外灯照射下,与参照品位置相同或相近高度处(约在点样点上方9mm处,以参照品实际展开的距离为准)出现紫红色斑点,说明样品中含有褪黑素;若没出现紫红色斑点,说明样品中不含褪黑素或含量低于检出限。
【检 出 限】
对照品0.05mg/mL;样品0.2mg/g。
【注 意 事 项】
1. 每展一张硅胶板更换一次展开剂(试剂B)。
2. 应尽量避免紫外灯直接照射眼睛和皮肤。
【储藏条件与有效期】
试剂在阴凉干燥处避光保存,有效期6个月。
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