2.2、接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,将金黄色葡萄球菌测试片(BT206)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右,使培养基凝固,每个稀释度接种两片。做一片空白阴性对照。
2.3、培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。 3、结果判读 培养后,测试片上紫红色的菌落为金黄色葡萄球菌;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本,用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验一次。 4、计数原则及报告方式 4.1、选择菌落数在20~200个之间的纸片进行计数。4.2、若两个稀释度的菌落数均在20~200之间,则取其平均菌落数乘以稀释倍数,即为每毫升(或每克)样品中金黄色葡萄球菌数。
4.3、如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于20,则计数稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之;如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长,则以小于1乘以稀释倍数报告之。 4.4、如果所有稀释度的菌落数都大于200,计数稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。计数菌落数大于200的测试片时,也可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数,换算成单个方格内的菌落数后乘以20(滤纸区面积为20cm2),即为测试片上估算的菌落数。报告单位以CFU/mL(或CFU/g)表示。 5、附加说明 5.1、本产品对于提高卫生行政监督部门应对细菌性食物中毒等突发性公共卫生事件的能力,具有重要的作用。 5.2、山东省疾病预防控制中心的验证结果表明,当金黄色葡萄球菌在0~9个菌落范围内时,测试片与血平板均能检出,作为致病菌不得检出的标准要求,可以作为金黄色葡萄球菌检验应用。
5.3、经试验,该测试片的检测灵敏度高,特异性强,重复性好。对纯菌的检测下限可达3cfu/mL,与营养琼脂计数、Baird-Parker培养计数和显色培养基计数比较,检测结果均无显著差异。(食品研究与开发2009,30(1):94-97)5.4、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。 6、保存条件本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水,在拆封前将整包回温至室温。产品操作视频
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