理化性质:白色至淡黄色粉末 , 熔点295.0~296.0℃。易溶于甲醇、乙醇、丙酮,难溶于氯仿、乙酸乙酯等弱极性溶剂。
1.免疫调节作用将黄芪甲苷、小鼠腹腔巨噬细胞及结核杆菌共同孵育,检测巨噬细胞对结核杆菌的吞噬能力,并检测培养液中γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量。结果显示黄芪甲苷的给药量分别为0.2、0.6、1.5、4.0gL-1时,巨噬细胞吞噬结核杆菌的结核杆菌DNA(TB-DNA)拷贝数以及上清液中IFN-γ和IL-1β的含量均明显高于对照组。黄芪甲苷具有提高巨噬细胞吞噬结核杆菌的作用。黄芪甲苷能够在体内和体外促进小鼠T、B淋巴细胞的增殖和抗体生成,促进非胸腺依赖区内B细胞增生、浆细胞大量形成及促进抗体合成的作用,但对胸腺依赖区的T细胞未见明显影响。2.器官保护作用(1)脑保护作用黄芪甲苷对小鼠瞬间局灶缺血所致的大脑损伤具有保护作用,其作用与作用有关,并有望成为治疗中风的临床药物。黄芪甲苷对脑缺血再灌注后大鼠血脑屏障具有保护作用。(2)肾脏保护作用黄芪甲苷对缺血再灌注导致的肾损伤具有一定的保护作用,可在肾脏移植时,有效保护肾脏,提高移植成功率。而且黄芪甲苷能下调肾脏组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的蛋白含量及mRNA的过度表达。(3)肺保护作用黄芪甲苷对于实验性大鼠的肺部缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,能减轻大鼠的肺瘀血、肺灶性出血。黄芪甲苷可以有效抑制卵白蛋白诱导的慢性哮喘。(4)心肌保护作用黄芪甲苷可明显改善心肌缺血、心肌梗死大鼠心功能,此作用与剂量和时间正相关。给Balb/C小鼠腹腔无菌注射柯萨奇病毒(CVB3)造成病毒性心肌炎模型后,用9%黄芪甲苷灌胃7天,可提高心肌炎小鼠生存率,减少胶原合成和心肌细胞凋亡。(5)肝脏保护作用黄芪甲苷可抑制胶原合成和肝星形细胞增生,对肝细胞纤维化具有明显的抑制作用。3.降糖作用以2型大鼠为研究对象,研究黄芪甲苷对链霉素和高脂饮食诱导的大鼠体内肝葡萄糖酶的调节作用。结果显示,黄芪甲苷给药量为25、50mg/kg时可显著降低大鼠的血糖、甘油三酯(TG)和胰岛素水平,并抑制相关mRNA和蛋白表达。另外,黄芪甲苷可抑制TNF-α诱导的3T3-L1脂细胞的脂解作用,从而降低游离脂肪酸(FFA)水平、增加胰岛素敏感性,起到、的作用。4.抗细胞凋亡作用黄芪甲苷能够明显降低CVB3病毒性心肌炎心肌细胞的凋亡指数。黄芪甲苷对阿霉素诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的凋亡具有一定的抑制作用,但无明显的剂量依赖性。5.抗病毒作用黄芪甲苷对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀有明显抑制作用,表现出较强的作用。黄芪甲苷具有抗乙肝病毒的作用。经过10d的给药治疗,在120、40和1Chemicalbook0mg/kg剂量下,其HBV抑制率分别为64.0%、49.6%和41.7%。同时观察到血清中乙型肝炎病毒(DHBV)DNA水平降低。6.作用黄芪甲苷作用与其能够清除自由基及抗脂质过氧化作用、促进蛋白质更新、消除核酸代谢障碍及促进人皮肤成纤维细胞的增殖和凋亡有关。黄芪甲苷在较低浓度(5~20mg/L)时可促进皱纹和无皱纹皮肤成纤维细胞增殖,促进皱纹、无皱纹和老年皮肤成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成,降低皱纹和无皱纹皮肤成纤维细胞凋亡率。7.促进细胞增殖作用适当浓度的黄芪甲苷可以促进软骨细胞的快速增殖并保持软骨细胞的活性,为软骨组织工程短期内获得大量的种子细胞并保持软骨细胞活性提供一条新途径。8.其他作用黄芪甲苷通过抑制Vav3.1基因的表达,起到一定的活性。通过NO-cGMP通路抑制钙离子向细胞内流动、抑制胞内钙离子释放、抑制去氧和血管紧张素Ⅱ的活性,对大鼠主动脉环血管和离体肠系膜动脉具有一定的舒张作用。测定方法HPLC法测定黄芪甲苷的含量色谱条件:柱:C185u4.6mm×250mm;流动相:乙腈-水(1:2);流速:0.8ml/min;柱温:25℃;检测波长:200nm。供试液制备:精密称取提取物粉末0.1g,加适量水超声溶解,然后用15ml×4的正丁醇(水饱和)振摇萃取,分取正丁醇层,挥干,残渣用甲醇溶解并定容至10ml,混匀后过0.45μm的微孔滤膜,即可。标准品溶液制备:精密称取黄芪甲苷标准品适量,用甲醇溶解,配成浓度为0.1mg/ml的溶液。测定法:用微量进样器分别吸取供试液及对照液20μl,注入液相色谱仪,记录峰面积,按峰面积外标法计算其含量。提取工艺黄芪甲苷在黄芪中含量很低,目前黄芪甲苷提取采用的煎煮水提、煎煮回流乙醇提等传统工艺,具有提取温度高、提取率低和提取耗时等缺点。的提取技术有高速离心法、微波辅助提取法、超声提取法、超滤法、超临界流体萃取技术、超高压提取法、高速逆流提取法。新的提取技术在提高黄芪甲苷提取率、缩短提取时间、防止活性成分破坏等方面具有重要的作用。CO2超临界萃取法提取黄芪甲苷工艺:称取15g黄芪,粉碎至40目,装入萃取釜,并向其中注入定量的夹带剂(体积分数75%乙醇)。将萃取釜放入超临界设备中。调节超临界二氧化碳流体温度、压力,以一定的流速将超临界流体泵入萃取釜中,萃取液旋风分离收集萃出物,离心浓缩蒸干提取物。二氧化碳超临界萃取黄芪甲苷的优化工艺条件为:萃取压力40Mpa,温度45℃,萃取时间2小时,夹带剂为95%乙醇,夹带剂用量4ml(95%乙醇)/g(干黄芪粉),CO2流量10kg/kg.h。
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