呕吐毒素免疫金标速测卡使用说明书
【产品简介】
呕吐毒素(Vomitoxin),是一种单端孢霉烯族毒素,主要由禾谷镰刀菌和粉红镰刀菌产生,化学名称为脱氧腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),容易存在于各种谷物类粮食及加工产品中,污染水平一般为mg/kg(ppm)级。DON具有很强的细胞毒性。人误食DON含量高的食物后,容易导致急性中毒头昏、、恶心、呕吐,以及白细胞缺乏症。
本检测卡对谷物(小米、玉米、大麦等)及其制品(蛋糕、饼干、面包等)中的DON含量进行快速、定量检测。不需要任何仪器设备,检测限为100 pbb。
【检测原理】
呕吐毒素免疫金标速测卡应用竞争抑制免疫层析的原理,样本中的呕吐毒素在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上呕吐毒素-BSA偶联物的结合。如果样本中呕吐毒素含量大于100pbb,检测线不显颜色,结果为阳性;反之,检测线显红色,结果为阴性。
【产品组成】
呕吐毒素免疫金标速测卡(40份/盒);说明书(1份/盒);塑料吸管(40个/盒);
【样品处理】(稀释因子为5)
准确称取1.0 g饲料、谷物、麦芽样品进行粉碎以使75%的样品可以通过20目筛,样品的大小颗粒与速溶咖啡相当。接着将粉碎后的样品放入三角瓶中,加入5 mL甲醇与水(1:9)的混合液(样品提取液),振荡15 min。静置5min后取上清液进行检测分析。取考虑不同样品对呕吐毒素的含量要求,可参考下表在1g样品中加入样品提取液的量
样品允许量(ug/kg) | 200 | 300 | 500 | 800 | 1000 |
1g样品中加入样品提取液的量(ml) | 2 | 3 | 5 | 8 | 10 |
稀释因子 | 2 | 3 | 5 | 8 | 10 |
【使用步骤】
(1)测试前请完整阅读使用说明书,并将未开封的检测卡和待检样本溶液回复至常温;
(2)从包装袋中取出检测卡后请尽快使用;
(3)将检测卡平放,用滴管吸取待检样品溶液,滴加3滴(约75 µL) 于加样孔中,加样后开始计时;
(4)结果应在5-8分钟读取,其他时间判读无效;
(5)读取结果时,检测卡水平置于观察者正面,如下图所示。
【结果判断】
s 阴性(-): T线显色(测试线,靠近加样孔一端),表明样品中呕吐毒素浓度低于检测线或不含呕吐毒素残留。
s 阳性(+): T线无显色,表明样品中呕吐毒素浓度高于检测线。
s 无效:未出现C线,可能操作不当或检测卡已失效。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的检测卡重新测试。
【注意事项】
⑴请勿触摸检测卡中央的白色膜面;请勿使用过期的检测卡。
⑵本公司提供的滴管请勿重复使用;本公司提供的试剂请勿食用。
⑶若需直接检测标准品,请用我方提供的PBS缓冲液进行配制。
⑷自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
⑸由于样本的差异,有的检测线颜色可能偏淡或偏灰,但只要出现条带,就可判定为阴性结果。
⑹出现阳性结果,建议用本卡复查一次。气质联用法是真菌毒素检测的确证方法。
⑺样本中的固体杂质颗粒会导致假阳性结果,取样时弃去肉眼可见的颗粒部分,有条件时请离心后取上清液做检测。
【特异性】
本产品与黄曲霉毒素、T-2毒素、玉米赤霉烯酮等真菌毒素无交叉反应。
【精密度】
同时用本产品和呕吐毒素ELISA检测试剂盒对包括146份阴性样本和140份阳性样本的286份样品进行检测,结果表明本产品与呕吐毒素ELISA检测试剂盒的结果符合率为95.1%。
【储存及有效期】
原包装在4-30 ℃阴凉避光干燥处储存,有效期为12个月,批号和有效期见包装盒。
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