一.前言:
肠道菌筛选双糖管属组合式生化鉴定系统,能辅助鉴别相关肠道和食源性病原菌。生化和酶底物搭配能提高鉴别的准确性和特异性。适合小型公共卫生和临床机构等检测机构的样本初筛。
二.产品组成:
1、 肠道菌筛选双糖管1×20支
2、 肠道菌筛选双糖管2×20支
3、 吲哚试纸条×20条
4、 硫化氢试纸条×20条
5、 说明书1份
三.使用方法:
1、 以灭菌接种环或针从过夜培养选择性平板挑取单个菌落,接种于管1斜面后向下穿刺至底部。
2、 抽出接种环并塞好管塞后将接种环穿刺至管2管底。
3、 取出接种环,塞好管塞,烧灼接种环灭菌。
4、 打开管2,于管口部悬置吲哚和硫化氢试纸条,避免纸条间接触。
5、 将管1和2置36±
四.生化结果的判别和常见肠道菌病原菌的预期结果:见表1和表2
表1. 经36±
鉴定项目 | 阳性 | 阴性 | |
管1 | 葡萄糖产酸 | 管1底部变为黄色,斜面不变色 | 管1仍为原色不变 |
甘露醇产酸 | 管1底部与斜面均变为黄色 | 管1仍为原色不变 | |
葡萄糖产气 | 管1穿刺线附近产生气泡或裂缝 | 管1不产生气泡或裂缝 | |
尿素酶 * | 管1部分或全部变为蓝紫色 | 管1不产生蓝紫色 | |
管2 | 蔗糖产酸 | 管2变为黄色 | 管2仍为原色不变 |
动力** | 管2琼脂变浑,穿刺线模糊不清 | 管2琼脂清澈,穿刺线清晰 | |
吲哚 | 吲哚试纸呈现红色 | 吲哚试纸不变色 | |
硫化氢 | 硫化氢试纸呈现黑色 | 硫化氢试纸不变色 | |
* 尿素酶阳性的情况下,可能影响管1其他项目的观察。 | |||
** 肺炎克雷伯菌为动力阴性,但因具有粘液性荚膜抗原而外观常有特殊表现,应注意区别。 |
表2. 重要的肠道病原菌对应组合生化和酶反应试验结果
病原菌 | 管 | 第二管 | 酶显色平板 | ||||||
氧化酶 | 葡萄糖 (下层) | 甘露醇 (上层) | 尿酶 | 蔗糖 | 动力 | 硫化氢 | 吲哚 | ||
伤寒、副伤寒 | - | + | + | - | - | +/- | -/+ | - | 酒红色 |
非伤寒、副伤寒 | - | ⊕ | + | - | - | +/- | +/- | - | 酒红色 |
志贺菌A群 | - | + | +/- | - | - | - | - | + | 白色或淡红色1 |
志贺菌B群 | - | + | + | - | - | - | - | -/+ | 白色或淡红色 |
志贺菌C群 | - | + | +/- | - | - | - | - | -/+ | 白色或淡红色2 |
志贺菌D群 | - | + | + | - | - | - | - | - | 蓝色3 |
小肠结肠耶尔森菌 | - | + | +/- | + | + | + | - | -/+ | 蓝色/白色4 |
小肠结肠耶尔森菌 | - | + | -/+ | + | +/- | - | - | - | 蓝色/白色 |
注:⊕:发酵产酸产气;+:发酵产酸;+/-:大多数阳性反应,少数阴性;-/+:大多数阴性反应,少数阳性。1:A群志贺Ⅰ型为兰色;2:C群鲍氏9型和15型为兰色;3:极个别菌ONPG阴性表现为白色或淡红色菌落;4:产毒生物型小肠结肠耶尔森菌可能为白色菌落生长。
五.注意事项:
1、 贮藏方法:2~30℃避光保存。日常保存竖直放置勿要倾倒,避免培养基水分因重力作用析出。
2、 如管2培养基有水渗出,将水倒去即可使用;或将管2水浴加热至培养基完全融化,冷却至培养基完全凝固即可使用,不影响实验结果。
3、 保质期:3个月。
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