土壤酸性蛋白酶（Solid -Acid Protease，S-ACPT）试剂盒说明书
可见分光光度法
产品内容：
试剂一：液体60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水充分溶解待用；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入100uL试剂七使粉剂润湿，然后加入20mL试剂一，转入烧杯中沸水浴磁力搅拌溶解后待用；
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入50mL蒸馏水充分溶解待用；
试剂五：液体10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂六：液体1.5mL×1 支，0.05mg/mL标准酪氨酸溶液，4℃保存；
试剂七：液体1.5mL×1 支，4℃保存；
产品说明：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ACPT在酸性环境下催化蛋白质水解，与土壤质含量、氮素及其他土壤性质有关。
酸性条件下，S-ACPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原菱酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。
所需仪器及设备：
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
操作步骤：
一、测定操作：
1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。
2、 试剂二、三和四40℃水浴10min。
3、 样本测定：
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 | |||
| 风干土样（g） | 0.02 | 0.02 | |||
| 试剂一（μL） | 100 | 300 | |||
| 试剂三（μL） | 200 |
| |||
| 混匀，40℃水浴30min，振荡5-6 次，使土样与反应液充分接触 | |||||
| 试剂二（μL） | 100 | 100 | |||
| 混匀，10000rpm 室温离心10min，取上清液 | |||||
|
| 测定管 | 对照管 | 标准管 | ||
| 上清液（μL） | 150 | 150 |
| ||
| 试剂六（μL） |
|
| 150 | ||
| 试剂四（μL） | 700 | 700 | 700 | ||
| 试剂五（μL） | 150 | 150 | 150 | ||
混匀，40℃水浴20min，680nm 下读取各管吸光值A
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