微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
土壤脱氢酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤体系内活性微生物量以及其对物的降解活性，可以作为土壤微生物的降解性能指标。
测定原理：
氢受体 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在细胞呼吸过程中接受氢以后，被还原为三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF 呈现红色，在波长485nm处有吸收峰，采用分光光度法于485nm测定其吸光值，即得土壤脱氢酶活性。
自备实验仪器及用品：
筛子、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰、蒸馏水、丙酮（不允许快递，请用户自备）。
试剂的组成和配制：
试剂一：粉剂×1 瓶，使用前加 5mL 水溶解，4℃避光保存（尽量现配现用）。
试剂二：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：丙酮，自备。
样品处理：
1. 土壤样品： 准确称取过40目筛的新鲜土壤样品约0.1g（以保证TTC与土壤颗粒充分接触）。
2. 污泥样品：污泥用蒸馏水洗涤，10000g，25℃，离心10min，弃上清，反复3-4次。
测定步骤和操作表：
1、分光光度计/酶标仪预热 0min，调节波长至485nm。
2、操作表
|
| 对照管 | 测定管 |
| 样品（g） | 0.05 | 0.05 |
| 试剂一（mL） |
| 0.1 |
| 试剂二（mL） | 0.2 | 0.1 |
| 置于 EP 管中，充分混匀，37℃，暗培养 6h，取出后立即冰浴 5min | ||
| 试剂三（mL） | 0.1 | 0.1 |
| 反复震荡数次，37℃保温 10min，10000g，4℃，离心 5min，取 200μL 上清于微量石英比色 皿/96 孔板，对照管调零，测定 A 485 。 | ||
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