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CRISPR/Cas9基因敲除载体

 
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所在地: 北京
有效期至: 长期有效
最后更新: 2021-06-12 04:56
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公司基本资料信息
详细说明

我们提供CRISPR/Cas9基因敲除表达载体构建和验证服务。我们可以根据您感兴趣的基因设计Cas9基因敲除靶点,构建CRISPR/Cas9基因敲除表达载体和验证载体,并且在细胞内验证基因敲除效率,验证的原理与细胞内实现基因敲除的原理一致,从而限度反应基因敲除质粒在活体内的活性。

我公司构建的pCas9/gRNA1载体可在哺乳动物细胞内同时表达人源化Cas9蛋白和gRNA,只需转染一个质粒就能实现对靶基因的切割。
Cas9蛋白的编码序列用人的密码子表达偏好进行优化,已验证可以在人、大鼠和小鼠细胞中高效表达。gRNA通过U6启动子启动表达。U6启动子属于III类RNA启动子,有精确的转录起始位点和终止位点,可以准确的转录出gRNA,并且在各种动物细胞中都表达良好。

CRISPR/Cas9载体构建服务

编号 名称 服务内容 提交报告 提交产品 周期 价格
C1001 CRISPR/Cas9载体构建服务 根据靶基因序列设计基因敲除靶点,设计并构建3个pCas9/gRNA1基因敲除载体。 已构建载体测序报告 1、3个靶基因基因敲除载体。
2、1个阴性对照载体。
2周 3600元
C1002 CRISPR/Cas9载体验证服务 1、根据靶基因序列设计基因敲除靶点,设计并构建3个pCas9/gRNA1基因敲除载体。
2、设计并构建基因敲除效率验证载体。
3、在293T细胞验证基因敲除效率。
1、已构建pCas9/gRNA1载体测序结果。
2、基因敲除效率证载体测序结果。
3、基因敲除效率验证实验报告。
1、3个靶基因基因敲除载体。
2、已构建的基因敲除效率验证载体。
3、阴性对照载体和阳性对照载体各1个。
3周 6800元
C1003 CRISPR/Cas9载体服务套餐 1、根据靶基因序列设计基因敲除靶点,设计并构建3个pCas9/gRNA1基因敲除载体。
2、设计并构建基因敲除效率验证载体和特异性验证载体。
3、在293T细胞验证基因敲除效率和基因敲除特异性。
1、已构建pCas9/gRNA1载体测序结果。
2、基因敲除效率证载体和特异性验证载体测序结果。
3、基因敲除效率检测实验报告。
4、基因敲除效率特异性检测实验报告。
1、3个靶基因基因敲除载体。
2、已构建的基因敲除效率验证载体。
3、已构建的基因敲除特异性验证载体。
4、阴性对照载体和阳性对照载体各1个。
3周 8800元

Cas9/gRNA基因敲除实例

基因敲除验证质粒pTYNE上有突变的GFP基因。pTYNE转染后表达出有移码突变的GFP,因此不产生荧光。根据pTYNE序列设计构建的Cas9/gRNA质粒表达Cas9蛋白和有pTYNE靶点的小RNA。pCas9/gRNA与pTYNE共转染293V细胞,48小时后产生荧光,显示pCas9/gRNA对pTYNE进行了成功的切割和修复。

图1:实验原理

CRISPR原理

图2:转染后荧光照片

cas9geneknockout

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