二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子,一价铜离子和的Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。BCA法只需一步,比传统的Lowry法两步法更快更简单,建议取代Lowry法用于蛋白定量。
特色 一步即可,可以在45分钟内完成,时间比Lowry法快4倍 高度敏感,检测蛋白浓度低至25 μg/ml,可检出1-20 μl样品中0.5 μg的微量蛋白 可以容忍样品各种去污剂,如5%SDS,5%Triton X-100,5%的吐温20/60/80 良好的线性范围:20-2000 μg/ml 针对不同的蛋白质的检测差别远低于考马斯亮蓝法 |
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