QuickShuttle系列转染试剂是一类具有、配方的阳离子型转染试剂,具有高效、低毒和易于使用等优点,推荐用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。QuickShuttle区别于常规转染试剂的两个最主要特点是:(1)可以在贴壁细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染(立传立转);(2)转染操作可在一分钟内完成。 重要提示 与常规转染试剂不同,使用QuickShuttle可在贴壁细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染(立传立转),从而可节省18~24小时的转染前细胞培养时间。 QuickShuttle极大简化了转染操作,转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育,可直接加入含血清的细胞培养基中进行转染,而且无需在转染后补加血清或更换培养基,整个转染操作可在一分钟内完成。 立传立转、一分钟完成转染操作和高转染效率等优点使得部分使QuickShuttle的转染实验可在细胞传代后24小时内完成,从而比常规转染试剂节约24~48小时。 以24孔细胞板转染实验为例,推荐一次(即每孔)转染的低内毒素质粒DNA用量为1~2μg、转染试剂用量为3~5μl(请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告基因进行优化),质粒和转染试剂可用无菌生理盐水稀释。 QuickShuttle经过DMEM、RPMI-1640和M199等常规培养基测试,虽然在实验中推荐使用DMEM,但有实验结果表明M199能够显著增强QuickShuttle对Vero细胞和293FT细胞的转染效果,因此可尝试使用不同培养基对转染条件进行优化。 QuickShuttle设计用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建,不推荐但可尝试用于哺乳动物原代细胞和二倍体细胞的转染。
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