免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素B1, 从而对黄曲霉毒素B1样品起到非常针对性的纯化作用, 过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素B1含量的检测。
亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的, 以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
[概述]:
黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液,动物饲料相关的产品中。其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性、致癌性、污染频率均居于。
[原理]:
测定的基础是抗原抗体反应,抗体连接在柱体内,样品中的黄曲霉毒素B1经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过黄曲霉毒素B1免疫亲和层析柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素B1,然后注入到分析仪器中用于检测。
[包装组成]:
每一个盒中包括25支或15支黄曲霉毒素B1免疫亲和层析柱及1份说明书。
[注意事项]:
----黄曲霉毒素B1可致癌,应戴手套操作。
----使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素B1溶液用pH7的高
氯酸溶液(10%V/V)浸泡过夜。
----不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
----2~8℃储存,不得冻存。
[样品处理]:
----玉米花生等样品粉碎,过2mm分样筛;
----25g过筛粉碎的样品加入5g 氯化钠与125ml 60%的甲醇溶液混匀;
----高速匀浆1min,用槽纹滤纸过滤;
----用10ml蒸流水稀释10ml滤液,再用微纤维滤纸过滤;
----取10mL上样检测。
* 根据需要可以增加样品量,但甲醇溶液的量也应相应增加。
[操作程序]:
----取出免疫亲和层析柱,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上;
----将柱子与泵流操作架上的玻璃针筒连接固定,10mL处理后的溶液上样;
----去掉亲和柱下方堵头,调节开关,使液体以2d/s的速度流出;
----待液体排干后,用蒸馏水或去离子水洗涤2次,每次10mL,流速2d/s;
----待液体排干后,上样1mL甲醇,用样品瓶接洗脱液,流速1d/s;
----洗脱后液体可用于HPLC。
* 使用前,免疫亲和层析柱需回至室温(22~25℃)。
* 每次上样前都要将上次液体完全排干。
[贮藏条件及保存期]
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该产品有效期为12个月。
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