沙丁胺醇(Salbutamol,SAL)是一种肾上腺受体激动剂即神经兴奋剂。此类药品在临床上用于治疗支气管哮喘、慢性和肺气肿等疾病,因此药可以提高瘦肉率,减少脂肪沉积和促进动物生长,被一些畜牧养殖企业作为养殖促进剂非法使用。其残留量可导致人体肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状,对消费者的健康极有危害,现已被明令禁止用于养殖业。
【测定原理】
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测猪肉等样本中的沙丁胺醇,在微孔条上预包被上偶联抗原,利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行的,样本中的沙丁胺醇和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗沙丁胺醇抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样品中的沙丁胺醇含量与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出沙丁胺醇含量。
【试剂盒技术指标】
规 格:96孔/盒
灵 敏 度: 0.1ppb
检测时间: 45min
样本检测下限:
尿 样 ………………………………… 0.1ppb
组 织(处理法一)…………………… 0.4ppb
肉样本(处理法二)…………………… 0.1ppb
饲 料 …… …………………………… 1ppb
交叉反应率:
沙丁胺醇(Salbutamol )…………………
克伦特罗(Clenbuterol)………………… <0.1%
莱克多巴胺(Ractopamine)……………… <0.1%
多巴酚丁胺(dobutamine)……………… <0.1%
样本回收率:
尿 样 ……………………… 95%±10%
组 织 ……………………… 85%±15%
饲 料 ……………………… 85%±15%
【试剂盒组成】
1、 微量测试孔:1×96孔板(12条×8孔)
2、 (Clenbuterol标准溶液X6瓶:(1ml/瓶)0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
3、 酶标记抗体工作液 10ml………………绿色帽
4、 底物A液 7ml ……………………白色帽
5、 底物B液 7ml ……………………黑色帽
6、 终 止 液 7ml ……………………黄色帽
7、 20X浓缩洗涤液40 ml ………………透明帽
【 所用仪器、试剂】
具备的仪器:微孔酶标仪、氮气吹干装置、打印机、均质器 、振荡器、离心机、恒温箱、天平(感量0.01g)、刻度移液管
微量移液器:单道20µl-200µl、100µl-1000µl、多道 250µl
试 剂: 乙酸乙酯、正己烷、浓HCl、乙腈、氢氧化钠、甲醇、无水硫酸钠
【样本前处理步骤】
样本处理前须知
处理任何样本时,都必须注意:
(a)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
(c)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必要时可对实验器具进行清洁,以避免污染干扰实验结果。
样本前处理需配制:
配液1、0.1M HCl 溶液
取0.86ml浓HCl加水定溶至100ml。
配液2、0.1M NaOH 溶液
称取0.4g NaOH加水定溶至100ml。
配液3、乙腈-0.1M HCl 溶液
V乙腈:VHCl =84:16
(a)尿样本的处理方法
取20µl清亮尿样直接测定(如果尿样浑浊一定要过滤或离心10min,4000r/min,直至得到清亮尿样),暂不使用的样本应冷冻保存。
样本稀释倍数:1
(b)组织样本的处理方法一
1、 称2±0.05g组织,加入6ml去离子水,充分振荡2min,室温4000r/min以上离心10min(注:若组织样本中油脂含量较高,可在振荡后放入85℃水浴10min后再离心)。
2、 取20µl上清液进行分析。
样本稀释倍数:4
(c)组织样本的处理方法二
1、 称取2 ±0.05g的组织,加入6ml乙腈-0.1MHCl,振荡2min,室温4000r/min以上离心10min。
2、 取上清3ml,加入2ml 0.1M NaOH,加入6ml乙酸乙酯,振荡1min,室温4000r/min 以上离心10min。取全部上清于50℃氮气或空气吹干。
3、 加1ml三蒸水复溶,混合30s,取20µl进行分析。
样本稀释倍数:1
(d)饲料样品的处理方法
1. 称1.0±0.05g研碎的饲料样品,加入10ml甲醇,再加入5g无水硫酸钠,放振荡器上振荡2min;15℃ 4000r/min以上离心10min;
2. 吸出离心后的上清液1ml,于56℃氮气吹干,用1 ml 去离子水溶解干燥的残留物,再加入1mL正己烷混合30s ;15℃ 4000r/min以上离心5min。
3. 取20µl下层进行分析。
样本稀释倍数:10
责权声明:
①本版块的所有文章及图片均为客户自行编辑,其版权为客户所有,客户需保证其编辑的文章及图片均无侵犯任何第三方的合法权益,如被第三方维权,由客户承担全部责任;
② 本网站仅为展示平台,如要转载,请与我网站联系协助获得授权;
③发布内容如有侵权,请及时联系我网站进行删除。
※ 联系电话:400-854-6788