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大鼠成纤维细胞提醒--细胞培养中的不贴 壁及分化的解决办法
如果细胞呈现不贴壁现象,且细胞根本就不能锚定的解决办法:1、 可以在铺有琼脂和琼脂糖的培养皿上克隆细胞,也可在衬有琼脂的 甲基纤维素的非组织培养用平皿制备细胞克隆。2、在这些支持物中 应适当添加生长因子及添加物。3、如使用组织培养用平皿克隆细胞 ,应在灌制琼脂等支持物前铺加饲养层。
如果细胞呈现不贴壁现象,但细胞能够锚定但贴壁不佳的解决办法: 使用铺加了甲基纤维素的专*供组织培养用用培养皿进行细胞克隆。
细胞培养如果细胞不发生分化,解决办法如下: 1、更换能够诱导 细胞分化的培养条件。 2、在细胞分离和传代中使用选择性培养基 。
细胞培养中如果所养细胞丧失产物形成能力,解决办法如下: 1、 采用PCR及Northern杂交方法,检测相关基因表达能力。 2、采用 PCR及Northern杂交方法检测报告基因和方案。 3、使用分化诱导 条件。 4、在细胞分离和传代过程中针对特定细胞使用相应的选择 培养基。
对于贴壁细胞系,分瓶培养也就是传代,通常包括去除旧培养基 ,用胰酶消化单层细胞(一些贴壁能力弱的细胞,如HeLa-S3细胞可 通过摇晃培养瓶来传代),在培养基中收集细胞,以新培养基稀释 细胞并以适当深度重新接种于新培养瓶中等步骤。
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