一是把好种鸡饲养关。人工授精的种鸡均实行笼养。由于笼内活动范围小，很易造成脂肪沉积，故必须根据鸡的增重情况，严格限制饲喂量，防止形成脂肪肝和出现脱肛现象，否则不利于对公鸡进行采精和对母鸡进行翻肛输精。
二是把好种公鸡的选择和调教关。用作人工授精的种公鸡，除应符合品种特征、生产性能和健康状况优良外，还要选择腹部柔软，提起双翅尾巴会向上翘，按摩时肛门外翻，泄殖腔大而松驰、湿润，交配器大、勃起，排精质量良好的公鸡。在输精前两个星期，对拟用的公鸡要进行采精调教，使之对保定、按摩、射精过程形成良好的条件反射，并可借此了解各个公鸡的性反射习惯。调教一般需7次左右。
三是把好消毒关。所有与人工授精接触的用具，在使用前，必须进行严格而彻底的清洗和消毒。养种鸡户最方便有效的消毒方法是煮沸，且所用水必须是蒸馏水。消毒结束后要烘干水分。不能用煮沸方法消毒的用具和操作人员的手则可用酒精消毒。待酒精充分挥发后再操作。
四是把好采精关。采精应在停水断料3～5小时后进行。采精时应根据各个公鸡的性反射习惯，把握适宜的按摩次数和用力的大小。按摩时间过长的或用力过大，公鸡都会形成逆刺激而不发生性反射，或因排粪尿和损伤粘膜而污染精液；用力太小，交配器外翻不充分，则容易缩回。采精时，手指和集精杯都不可接触交配器。一只公鸡宜用一个集精杯，采后再将精液用滴管合并，以防不洁精液影响整杯质量，被粪便等污染的精液应舍弃。冬季采精时，集精杯要预热至35℃～40℃。
五是把好精液品质关。优质精液为乳白色、浓稠液体。当种鸡有病或精液中混入粪尿等，精液往往颜色异常、稀薄，这种精液不宜作输精用。精子的活力和密度应进行镜检。
六是把好精液稀释关。稀释应在采到精液后立即进行。配制稀释液时，应做到器具精洁、称量准确，药品纯净、溶解充分。稀释前要精确计算稀释倍数，稀释液要预热到35℃～40℃。稀释时沿集精杯壁徐徐加入精液中，最后用滴管混匀。
七是把好输精关。输精时，插吸嘴动作要轻，不要硬插，防止护伤阴道。吸嘴要插入阴道2.5～3厘米深。精液压出后不要立即放松压钮，以免加收精液；吸嘴要贴着阴道上壁抽出，以免引起精液外流。输精量要确保每天有1000万个有效精子，通常需输外观品质良好的原精液50微升。输精应在产蛋3小时后进行。正常情况下，生产鸡群一般可安排6～7天为一个输精周期。
