一、合理用药
青霉素为广谱抗生素，只对多数革兰氏阳性菌、部分革兰氏阳性球菌、螺旋体、放线菌等有强大的作用，对革兰氏阴性菌如大肠杆菌、沙门氏菌等作用很弱，对结核杆菌、病毒等无效，对耐药的金葡菌也无效。对生长旺盛的敏感菌作用强大。如果使用3-5天仍无效，要考虑换药。
二、适当的用药间隔和疗程
青霉素在生物体内经过3-4小时约90%已排泄，6小时血药浓度明显降低。而细菌受到青霉素的冲击后再生只需3-4小时不接触药物，而重新繁殖的细菌易产生耐药性，所以青霉素每日应使用2-3次，连续使用3-5天，在症状消失后再巩固用药1-2天。
三、恰当的给药途径
青霉素钾（钠）不耐药，内服易被胃酸消化酶破坏，仅有少量吸收，一般达不到血药浓度，故不宜内服，又因为其水溶液极不稳定，放置时间越长分解越多，一般不饮水。最佳的给药途径是肌肉注射或静脉滴注，有些疾病治疗，比如创伤（化脓期）蜂窝组织炎和腐蹄病等，必须采用局部用药和全身给药相结合。
四、合理的联合用药
⑴青霉素与氨基糖菌类抗生素可协同作用，如链霉素、庆大霉素等。⑵青霉素与丙磺舒、水杨酸类有协同作用。⑶作用于繁殖期的青霉素与抑菌剂如四环素、大环内酯类有协同作用。⑷青霉素在近中性溶液中较为稳定，应用时最好用注射用水或生理盐水溶解，现配现用，绝对不能与维生素C、维生素B、碳酸氢钠、阿托品、盐酸、肝素、去甲肾上腺素等混合使用，以免产生混浊，降低效价。
