1.不与碱性药物配伍。口服的碳酸氢钠、人工盐、健胃散和注射用的磺胺类钠盐注射液、氨茶碱注射液等都是碱性，与其配伍可使氯霉素受破坏而失效。
2.不与酸性药配伍。酸性药物如四环素、土霉素、维生素C、盐酸硫胺、葡萄糖酸钙等，与氯霉素配伍可发生沉淀。肌注则吸收不良，降低疗效；静注则栓塞血管，造成局部循环障碍，甚至危及生命。
3.不可静脉注射。氯霉素半衰期短，马属动物注射此药半衰期仅一小时，为了维持血浆中有效浓度，每小时要注射一次，易引起脉管炎，还浪费药物和人力。
4.不与收敛、吸附药物配伍。鞣酸、鞣酸蛋白等收敛药物，可使胃粘膜收敛，影响氯霉素的吸收。高岭土、药用炭、氯化银、矽炭银等吸附药，能吸附氯霉素，降低疗效。
5.对仔畜禽慎用。仔畜禽肝脏功能不健全，肾脏排泄功能低，使用氯霉素后血清浓度较成年畜禽高，持续时间长，所以用量要低。
6.成年反刍兽不可口服。因牛羊瘤胃有破坏氯霉素的作用，口服效果不佳，且口服破坏反刍兽瘤胃内正常微生物区系。
