按照国标GB 5009.121-2016方法， 以0.02mol/L乙酸铵+甲醇=90+10 1mL/min的流速，可以得到脱氢乙酸的图谱，但在1L乙酸铵中加入1mL的乙酸后，按照上述方法，就不出峰，请问是什么原因?
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脱氢乙酸是我国允许在食品生产加工中使用的一种化学合成防腐剂，在较高的pH范围内保持良好的抗菌性。
脱氢乙酸是极性化合物，因其含有双键具有紫外吸收，在C18色谱柱有一定的吸附保留。在GB 5009.121-2016液相色谱法中使用0.02mol/L乙酸铵+甲醇(90+10)作为流动相，对脱氢乙酸作等度洗脱。
通常可电离化合物而言，不同状的化合物态与C18之间的作用力存在明显差异。脱氢乙酸pKa值为5.27， 而0.02mol/L乙酸铵+甲醇(90+10) 流动相体系的pH值在7-8， 在此体系中，大部分脱氢乙酸处于离子态。当原有体系中加入乙酸酸化后，流动相体系的pH值有利于脱氢乙酸从离子态向中性态转化，从而促使脱氢乙酸与C18的作用力更强了，因此，相对而言，乙酸铵+甲醇(90+10)流动相洗脱能力变弱了，导致脱氢乙酸在C18色谱柱上的保留时间更长，或长期保留在色谱柱上。只有延长酸化后流动相的洗脱时间，或增加酸化后流动相中有机相的比例，可将脱氢乙酸从色谱柱中洗脱出来。
文章（文字）来源：研发分析
