菌种试验用菌株的传代次数不得超过5代(从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0代),并采用适宜的菌种保藏技术进行保存,以保证试验菌株的生物学特性。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B)26 003〕
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC(B)10 104〕
大肠埃希菌(Escherichia coli)〔CMCC(B)44 102〕
白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC(F)98 001〕
生孢梭菌(Clostridium sporogenes)〔CMCC(B)64 941〕
乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)〔CMCC(B)50 094〕
2.1金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物置于TSA上或TSB中,30-35℃,培养18-24h。
2.2生孢梭菌的新鲜培养物置于FTM中,30-35℃,培养18-24h。
2.3白色念珠菌的新鲜培养物置于SDA上,20-25℃,培养2-3天。
2.4黑曲霉菌的新鲜培养物置于SDA上,20-25℃,培养5-7天,或直到活的丰富的孢子,用0.05%聚山梨酯的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠将孢子洗脱,然后,吸出孢子悬液至无菌试管内,用0.05%聚山梨酯的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠制成适宜浓度的菌悬液。
2.5菌液制备后若在室温下放置,应在2小时内使用;若保存在2~8℃,可在24小时内使用。生孢梭菌孢子悬液可替代新鲜的菌悬液,孢子悬液可保存在2~8℃,在验证过的贮存期内使用。
为确认试验条件是否符合要求,应进行阴性对照试验,阴性对照试验应无菌生长。如阴性对照有菌生长,应进行偏差调查。
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