紫外线作为一种诱变剂，在特定的波长范围（主要是UVC200 – 280 nm）以及足够高的剂量下，能够引起细菌和病毒等微生物细胞中的DNA或RNA相邻嘧啶分子间形成异常的化学键，阻碍DNA或RNA的复制，从而造成微生物细胞死亡。
常见的紫外线杀菌消毒属于照射消毒，只需将紫外线杀菌灯照射需要消毒的物品，或在需要杀菌消毒的环境放置紫外线杀菌灯即可。紫外线可集中很高的强度在短时间内杀灭细菌和病毒，属于纯物理消毒方法，无二次污染。那么，与常规的化学消毒和加热消毒相比，紫外线消毒的效果又该如何判定呢？
《消毒技术规范》卫生部（2002年版）是紫外线杀菌灯表面杀菌消毒效果评价常用的标准之一，此标准通过测定紫外线灯(包括双灯管组合灯具) 的辐照强度及对微生物的杀灭作用，以验证其杀菌性能是否达到合格标准。
辐 照 强 度
普通型或低臭氧型直管紫外线灯( 30W )，新灯管的辐照度值应≥90μW/cm2。使用中的灯管，辐照度值应≥70μW/cm2。多灯管组合灯具的测定方法和合格标准同单支灯管。对异型(非直管型)、高强度型，或非 30W 功率等灯管的检测距离和辐照度值合格标准，随产品用途和使用方法而定。原则上，应不低于产品使用说明书注明的辐照度值，并按其推荐剂量[即辐照度值乘以照射时间(s)]进行杀菌试验，证明能满足应用所需效果者可判为实验室测试合格。同时，辐照强度检测每次鉴定抽查 10 支灯管，每支灯管重复测定 3 次。各次数据均达标准才可判辐照强度合格。
微生物杀灭效果
评估菌种：金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)、铜绿假单胞菌（ATCC 15442）枯草杆菌黑色变种(ATCC 9372)芽孢等细菌及其芽孢和真菌。
在进行微生物杀灭效果测定时，按技术规范规定的方法首先制备细菌及其芽孢和真菌菌片，在指定的照射位置上进行照射。照射分为 3 个时间组，各组时间的设置应使能测出将试验细菌及其芽孢和真菌杀灭对数值≥3.00所需的最低剂量，完成将照射后样本进行活菌培养计数的测定。
测试中，同时设立阳性对照组(菌片对照)与阴性对照组(培养基对照)。阳性对照组，将该批菌片 2 片分别放入含 5.0ml PBS 试管中，电动混匀器震荡20s或各振敲 80次。阴性对照组，以同次实验用培养基或 PBS 接种培养基培养，观察有无细菌生长。
试验重复3次。每次试验中的阳性对照菌片，检测回收菌量均应在5×10⁵cfu/片～5×106cfu/片，阴性对照组应无菌生长，各次试验对细菌及其芽孢和真菌的杀灭对数值均≥3.00。该照射时间可判为消毒合格所需照射的时间。对异型(非直管型)、高强度型，或非 30W 功率等灯管的照射距离，需随产品的用途和使用方法而定。
除以上两项之外，紫外线灯产生的臭氧量也可影响杀菌效果和使用的安全，故还需测定臭氧浓度进行综合评价。技术规范中指出：臭氧浓度应写明于使用说明书中，低臭氧紫外线灯产生的臭氧浓度，应不超过国家规定的工作场所安全浓度（0.3mg/m3）。
