现行的沉降菌和浮游菌除了采样方法不同，其他意义何在？
答：沉降菌和浮游菌都是空气微生物，但是它们代表的意义不同，沉降菌是没有办法时候的选择，就等于说你没有相关的仪器设备，你只能用沉降菌的方法来做，但是沉降菌只是大颗粒，容易掉下来的，不能代表真实的空气中微生物的数量，而浮游菌相对来说是更能直接表达空气的卫生污染程度的，它们两个是不太一样的。
老师购买的一次性带包装的培养皿可以在无菌室或培养室暂存吗？
答：如果你买的商品化的培养基带包装的培养皿，可以放在无菌室暂存，但是这个保存期就要缩短。一般来说，商品化的一次性培养基都是需要避光冷藏保存的，在避光冷藏保存下，一般规定了保质期。但是你如果放在无菌室，短时间可以，但是它的保存期就难以估计了，另外还有光，光照对培养基也是有影响的。你可以暂存，暂存是可以的。
如果在无菌室外暂存进无菌室还需要通过传递窗紫外杀菌吗？
答：一般不需要，因为是这样，培养基是包装好的，进了无菌室直接把包装拆掉，它外包装上的污染就没有了。通过传递窗紫外灯杀菌，紫外线只能照到上面，又不能穿透，又不能拐弯，所以紫外灯的杀菌范围、面积都是很有限的，并不能真正解决外包装物上面有污染这个问题。
车间和无菌室的环境采样多长时间测一次？
答：GB/T 27405-2008有规定，27405的附录是规定无菌室每两周做一次，有标准依据。
生产环境监控中，涂抹手，设备表面地面墙面等的面积，方法，以及判定标准
答：生产环境监控一般来说是按照GB 14881-2013这个标准的系列——良好生产工艺规范来规定。但不是每一种食品类别的生产环境都是有明确规定的，像包装饮用水GB 19306-2018就有明确规定的，每只手该怎么样限量等都是有规定的，但是多数类别是没有标准规定的，因为不同的商品生产是有不同的面积要求限值的，这个没法一刀切。
老师听过上次您有关沉降菌的课，有个疑惑GB 50591-2010里面培养皿放置在地面及其以上0.8m之内的任意高度，16294的0.8-1.5m哪个检测出来的结果更具有说服力？
答：关于沉降菌，我们检查的是你正常操作的高度上到底有没有微生物污染。所以，如果你操作台面是0.8m高度或者包装饮用水灌装是1.5m高度，那你觉得在生产线的哪个地方哪个高度需要检微生物？我觉得目前没有一个生产企业是需要检地面上的，培养皿放地面上暴露，在地面上的高度没有人在这位置进行生产操作的，所以这个位置的微生物污染对我们是可以忽视的。因为层流送风一般是从上往下吹，那么吹到地面上是最脏的时候，你检那个地方有什么意思呢？完全没有任何意义，我们只要检我们的正常操作高度，就是正常高度0.8-1.5m之间哪个位置有用，当然你说你在2m的高度操作也可以，或者你说我在0.5m的高度操作，这个也是允许的，但是你在地面上检验，没有什么说服力，我觉得基本上没有需求。
老师好，有没有环境存在新冠病毒检测方面的研究，我们正在做疫情防控，想了解一下，我们的门把手、桌面是否含有新冠病毒，含有的可能性多大？谢谢。防控工作中我们负责采集样本。
答：讲课的时候讲到过，北京疾控昨天还是前天公布的就是他们做了门把手等，都没有新冠病毒，做了很多份，所以一般来说你不需要在做了。即使有这个病毒，有患者接触过这个门把手，过一会这个病毒也是死掉了，你检出来的新冠病毒核酸也不是活的病毒，没有什么感染性。那如果说你一定要检，你可以按照卫生部的新冠病毒防控手册第七版看看。
氮气，无菌气，如何取样？
答：你可以把氮气接个管子通到采样器上，或者把氮气直接对着空白的TSA琼脂平板直接吹，就让它撞击撞到琼脂表面上去。同样的，你需要选择一个定量的流量（升）或者说是每立方米数，吹了一立方米，然后你再培养来计数这个样品。
员工手部和工器具设备检测有标准吗？
答：有的，员工手部和工器具设备检验，最方便最直接的标准依据是卫生部的《消毒技术规范》。
两虫检测需要哪些设备设施
答：两虫检测有半自动的和全自动的，包括了富集装置浓缩和检测系统，全自动的价格在一百万左右波动，不建议买，半自动的是10几万到30几万之间吧。
老师，请问一下生活饮用水做微生物如果超过4h检测，或者隔天检测，是不是时间越长会导致一部分微生物死亡而不是增长呢？
答：不好说，生活饮用水如果你放了超过4 h检测或者隔天检测，不能确定微生物就是死亡还是繁殖了，比如说生活用水中有铜绿假单胞菌，这种菌能够利用很少很少，哪怕塑料包装瓶上一点点塑料的溶出物，都可以繁殖，所以说隔天有可能绿脓会越长越多。
霉菌培养箱的霉菌怎么处理？
答：平时最简单的就是先喷一些酒精杀菌，然后挥发干了以后你测一下，如果还是不行的话，培养箱里面如果有电源插座的话，也可以加一盏紫外灯。在里面，它会产生一些臭氧，也能够杀死一些表面的微生物。如果严重污染的情况，建议用甲醛熏蒸，甲醛对培养箱没有任何的腐蚀作用，反正闷在里面。使用乳酸、二氧化硫之类，对设备腐蚀性太强。
拌面酱微生物检测前是否需要进行前处理，因为含有液态食用植物油的情况，是否需要用石蜡进行预处理呢？
答：感觉你这个是复合调味料，我觉得你不要加液体石蜡，而是应该加吐温80，加吐温80然后全部去均质，因为吐温80能让植物油完全乳化，就像做奶油检验一样。如果你觉得目前没法想象具体如何操作，就可以参照GB 4789.18-2010奶油的检验方法，按照奶油的方法来做，绝对没问题。
老师上次讲沉降菌，采样后由于运输时间长，放在当地其他实验室里培养，请问这样处理的话仪器质量控制方面怎么写？
答：仪器质量控制记录为当地的培养箱。因为我们在当地的疾控中心的实验室也是通过实验室资质认定的，也是通过国家实验室认可的，这样的情况就相当于我们租用他们的实验室仪器设备，把合同写清楚就好了。他们肯定有相应的质量控制，我们只要能够保证溯源，能够查到就可以了。
加标一般理化会这样执行，微生物一般一次做完可以这样理解吗？
答：你就是平行采两份，看它们之间的偏差，比如说我到现场采了两份生活用水，一份作为检验样，一份作为平行样，如果两份样品数值差了很多就不对了。但是，具体差多少算为不合格，那要实验室自己定，只是说现在这个标准规定你要这么做，只是没有说要怎么判定。理化有规定偏差多少以上判定不合格，但是微生物没有具体的规定，要怎么判定还是要实验室自己规定。
请问老师：1）关于生产车间表面微生物取样和检测的相关标准都有哪些？2）对于车间地面采样点如何布置，最少需要几个取样点？3）如需要检测致病菌（如沙门氏菌），取样点和取样量该怎么布置？
答：1）生产车间的表面取样按照GB 14881系列标准食品生产卫生规范。有的标准GB 19306 包装饮用水的是有明确规定的，大多数的产品没有具体规定，不同的食品种类是不一样的，具体的还要等修订。2）不要做地面，因为没人在地面上做生产，只需要做0.8-1.5 m的操作面积高度上。标准规定的很明确，可以自己定。3）一般生产车间表面是不需要检沙门氏菌的，应该检验简单的常规指示菌如菌落总数或者大肠菌群或者肠杆菌科就可以了。如果完全没有大肠杆菌或者说肠杆菌科，沙门氏菌也不可能存在的。单纯的检一个目标菌意义不大，你也不能保证其他的致病菌就不存在。
答：必须是采样完再添加。只有知道现场检测后才知道是否有余氯，才能添加。不能高压灭菌前添加在采样容器里面。
皿为单位是多长时间？
答：要根据具体执行的标准。有的五分钟，有的半小时，有的四小时，甚至有的可以连续暴露过夜。
老师，请问一下，做空气微生物，如果平板都是没有长菌，结果应该报0，小于1还是未检出呢？
答：都可以，空气微生物的检验方法标准都比较粗，并没有规定怎么报告。一般都需要实验室自行规定，建立自己实验室的作业指导书。
那平板平均值如果是0.8，那结果报多少？可以直接写0.8还是1？
答：不好说，自己规定。还是需要实验室有作业指导书来统一规定怎么做。但是需要注意避免因为修约把0.8变成1导致判定为不合格的情况——国外机构要求百级洁净度都是＜1，我国可能是允许≤1。这时候，明明是0.8判为合格，被你修约后报告1，可能就变成不合格结果了。
搭皿盖这样是错误的，那怎样是对的
答：建议听上一期的GB/T 16294的课程。最简单的办法是带一些灭菌的报纸去现场，铺在桌面上，把平皿放在上面，平皿盖也直接放在上面，绝对没有污染的问题，而且报纸可以防止桌面上的灰尘飘起来到平皿里。
