食品安全国家标准审评委员会秘书处关于征求《食品中低聚半乳糖的测定》等17项食品安全国家标准和修改单（征求意见稿）意见的函
发布时间：2022-03-31来源: 食品安全标准与监测评估司
食标秘发〔2022〕2号
各有关单位：
根据《食品安全法》及其实施条例规定，我委组织起草了《食品中低聚半乳糖的测定》等17项食品安全国家标准和修改单（征求意见稿），现向社会公开征求意见。请于2022年5月10日前登录食品安全国家标准管理信息系统:
http://sppt.cfsa.net.cn:8086/cfsa_aiguo在线提交反馈意见。
食品安全国家标准审评委员会秘书处
2022年3月30日
GB 4789.40征求意见稿相对于2016年发布的《食品安全国家标准 食品微生物学检验 克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》（以下简称2016版）有哪些不同之处呢？食品伙伴网食品微生物检测小编对此进行了相关对比，以供大家参考。
将标准名称由《食品安全国家标准 食品微生物学检验 克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）检验》修改为 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 克罗诺杆菌检验》。
适用范围改为“婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品、乳及乳制品及其原料中克罗诺杆菌的检验”，增加了婴幼儿辅助食品。
我国现行食品安全国家标准GB 4789.40-2016中规定的克罗诺杆菌属检测方法，采用44℃的选择性增菌温度，该温度与ISO 22964-2006相同，但是，44℃培养在国际上存在争议，该温度被认为会抑制部分克罗诺杆菌生长，而降低检出率。
因此本次修改将mLST-Vm 肉汤增菌温度由原来的44℃±0.5℃调为“41.5 ℃±1 ℃”来培养。同时修改了BPW的预热温度调至41 ℃，避免温度较高损伤细菌，减少漏检的可能。
ISO 22964-2017中分离平板TSA是36℃±2℃培养21h±3h，FDA方法中分离培养也是36℃培养18-24小时，因此本次修改也将TSA平板的培养温度和时间由“25 ℃±1℃培 养48h±4h”调整为“36℃±1℃培养24 h±2 h”。
有文献报道约，部分克罗诺杆菌在TSA上不产黄色素，仅依靠TSA上产黄色素来作为是否进行生化鉴定的依据会造成漏检，目前在ISO22964-2017也被取消，因此在新版标准中将该生化鉴定中“产黄色素项目”删除。
GB 4789.40-2016中苦杏仁苷生化反应为阳性，目前国际上已不再使用该生化反应用于克罗诺杆菌鉴定，而删除该反应也不影响该菌的判定，因此在本次修订中将生化鉴定中的“苦杏仁苷项目”删除。
GB 4789.40-2016中，各类培养基的pH值均在高压前进行调节，研究发现高压过程会对培养基的成分产生影响从而改变pH值，ISO 22964-2017等国际方法已将该值调整为高压灭菌后25 ℃时的pH值，GB 4789.28-2013中也要求pH值应为灭菌后测定，因此在本次修订中也将其进行了修改。
增加PCR属鉴定方法作为选作项目可以减少工作量的同时，节省检测时间。另外该方法包容性较好，对于克罗诺杆菌不会发生漏检的情况，能够满足可疑菌落的高通量筛选的需求。因此在本次修订也增加了“PCR鉴定方法作为选做内容”的修改。
GB、BAM、ISO检验方法差异比对 | ||||
方法来源 | GB 4789.40-2016 | GB 4789.40-XXX （征求意见稿） | BAM | ISO 22964-2017 (定性) |
取样量 | 定性: 100g | 定性: 100g | 定性: 100g | 10g/10mL+90mLBPW |
定量: 100g、10g、 1g | 定量: 100g、10g、 1g | 定量: 100g、10g、 1g | ||
增菌 | BPW（预热44℃）预增菌 | BPW（预热41℃）预增菌 | BPW预增菌 | BPW预增菌 |
mLST-Vm选择性增菌 | mLST-Vm选择性增菌 | CSB选择性增菌 | ||
培养条件 | BPW: 36℃±1℃培养18h ±2h | BPW: 36℃±1℃培养18h ±2h | 36℃±1℃培养24h±2h | BPW: 34℃- 38℃培养18h ±2h |
mLST: 44℃+0.5℃培养24h +2h | mLST:41.5 ℃±1 ℃培养 24h +2h | CSB: 41.5℃± 1℃培养 24h ±2h | ||
分离培养 | 阪崎肠杆菌显色培养基 | 克罗诺杆菌显色培养基 | DFI和R&F琼脂 | CCI琼脂 |
计数方法 | MPN | MPN | MPN | 无 |
确证实验 | TSA平板产黄色素、氧化酶阴性、L-赖氨酸脱羧酶阴性、L-鸟氨酸脱羧酶阳性、L-精氨酸双水解酶阳性、柠檬酸水解阳性、D-山梨醇阴性、L-鼠李糖阳性、D-蔗糖阳性、D-蜜二糖阳性、苦杏仁苷阳性 | TSA平板产黄色素、氧化酶阴性、L-赖氨酸脱羧酶阴性、L-鸟氨酸脱羧酶阳性、L-精氨酸双水解酶阳性、柠檬酸水解阳性、D-山梨醇阴性、L-鼠李糖阳性、D-蔗糖阳性、D-蜜二糖阳性、苦杏仁苷阳性 | VITEK 2.0或Rapid ID 32E | 氧化酶、4-硝基苯基a-D吡喃葡萄糖苷底物、L-赖氨酸脱羧酶、L-鸟氨酸脱羧 酶、甲基红(可选)、VP (可选) 发酵: D-阿拉伯糖醇、D-山梨醇、D-蔗糖、a-甲基-D-葡萄糖苷阳性(可选) |
分子方法 | 无 | PCR | PCR | 无 |
