好了,废话说到这,进入正题:
首先,TTC有毒,不仅毒细菌也毒人,所以使用的时候要小心(其实用别的化学试剂也要小心,不好意思,又说废话了)。接着我个人是配置的0.5%的TTC溶液,你们可以根据个人的需要配置不同浓度。
配置方法:实验室用水(我们用的桶装纯净水)200mL,TTC粉末1.00 g,水不用灭菌,我个人是稍微加热(大概40℃水温这样就完全溶解了),也可以搅拌至完全溶解,然后倒入棕色瓶子,放无菌室静置大概72小时(我个人是放置72小时,不确定24小时或者48小时行不行),此时配置出来的溶液加入空白培养基是养不成菌落的(我觉得这也说明了这东西有毒)。没必要先把水灭菌,也没必要加入PDA培养基里一起121℃灭菌。
使用剂量:我一般是500mL PDA培养基 配 2.0mL 的 0.5%TTC 溶液,在无菌室里操作,在倒平板之前加,摇晃均匀就可以,本人亲测,对解决菌落蔓延问题非常有效,而且也不会有明显的抑制细菌生长导致实验不准确的情况。
温馨提醒:放置条件:避光低温保存(我是室温保存的,化验室经常开空调,大概在20-25℃左右,(下班了就25-30℃左右),目前放置了一个多月,没有出现粉红色。我查找资料的时候,说是溶液呈粉红色就要从新配置了。
目的 : 为便于区别样品颗粒与菌落,可在每 100mL 琼脂培养基中加入1 mL、 0.5% 的 TTC 溶液,如有细菌存在,培养后菌落呈红色。
配制 : TTC 0.5g,蒸馏水 100mL,溶解。定性滤纸过滤,滤液置于棕色瓶中,4°C冰箱冷藏 。
灭菌 : 配好的0.5% TTC, 过滤除菌后置于棕色瓶中4°C冰箱冷藏 ; 或按预计使用量分装入小管,115℃高压灭菌 20min 、121度高温灭菌15min,过后4°C冰箱冷藏。
使用 : 临浇平板前,再按前述比例将TTC与培养基混合摇匀。
只是分享经验,数据结论仅代表我自己亲身试验得出的较合理结论,不具备权威性哦!
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