一、拿样/取样
拿样:已有人取好样品,放在一个固定的地方,检测员每天上班后,拿好一个干净的密闭容器,去把样品拿回实验室,期间注意样品被污染。
取样:也叫抽样,需要自己去取/抽,去成品库取成品,去车间现场取半成品、接触面、非接触面、水、冰、内包袋、空气、辅料等。无菌取样,熟悉取样方法、流程,带好取样工器具,做好样品标识。取完样,放在干净密闭的容器,带回实验室,做好样品登记。
二、无菌室灭菌
一般采用紫外灯灭菌。实验室前、后打开紫外灯照射30分钟。注意实验前关灯后30min方可进入室内工作。很多人分不清无菌室和超净工作台的使用和区别,本人理解:无菌室是用来做样品前增菌的,超净工作台是用来做致病菌分离和特征/可疑菌落的进一步验证的。
三、配制培养基和相关试剂
现在用的干粉培养基较多,按照检测方法需要的培养基,买回来就行;用过的厂家有:北京陆桥、青岛海博和广州环凯。按照样品数量配制相应的培养基,也可以多配点,放着冷藏保存,有效期7天。干粉培养基保质期一般是3年,开封后1年,一年一瓶都用不了的,稀少。配制培养基的水,一般选择单蒸水。
培养基一般选择湿热灭菌法,称量好干粉培养基,加入相应的单蒸水,搅拌溶解后分装,塞上瓶塞或试管塞,用报纸或牛皮纸包扎好,橡皮筋捆好,放入高压灭菌锅。现在有些实验室是手提式灭菌锅,需要手动排气,人工计时,看压力表,比较累。
培养皿和吸管:一般选择干热灭菌,可我工作过的几个实验室,干燥箱基本是用来干燥的(使用温度高容易坏,灭菌时间太久不想等待),也可以不用外校。培养皿和吸管包扎好后,放入高压灭菌锅灭菌。
培养基、培养皿、吸管等,灭好菌后,需冷却;然后通过传递窗搬进无菌室。
四、无菌室增菌
采样注意部位和代表性,一般采取可食部位。致病菌采样部位视具体样品而定。注意交叉污染。现在一般采用拍打式均质器。
五、做好标识
每个实验室标识最好是统一的做法,这样大家都能认识,把增菌好的试管和瓶子,通过传递窗拿到培养室放进相应的培养箱进行培养。
六、整理无菌室
做完实验,需要把无菌室整理好,工器具摆好位置,台面做好清洁卫生。打开紫外灯灭菌30分钟。
七、影响微生物检测结果的因素
7.1 人 上岗培训,熟悉检测方法;
7.2 机 仪器设备正常运行,定时维护保养;
7.3 料 材料正确,有效;
7.4 法 检测方法适合样品检测要求;
7.5 环 环境满足微生物检测要求。
八、微生物检测的几点看法
8.1 资质证书:今年取消的食品检验工资格考试,而且每个省份,每个行业要求不一样,最好是边工作边考证。进入工作岗位,工作能力比证书重要。
8.2 熟悉检验方法,下载现行有效的版本,食品伙伴网提供免费下载。
8.3 25g称样量的波动范围,GB4789标准中没有明确,美国《微生物实验室指南》中提到:a.温度的波动范围是±1℃;b.重量和容量的波动范围是±1%;在该指南的第4.09章沙门氏菌检验中又指出:除特别规定,方法中所有指标的波动范围是±2%。据此推理,25g称样量的波动范围在±0.5g以内是合适的。
8.4 仪器计量 温度、重量,压力等影响实验结果的仪器需要外校,同时实验室需要内校,温度用水银温度计内校,重量用标准砝码内校。一般外校的有效期是1年,高压灭菌锅的压力表是半年。
8.5 参加培训,多学习肯定是好的。
8.6 有条件的,每年至少参加一次外部能力验证,检验一下实验室的检测结果准确度,同时提升实验室的可信度,外部审核或客户验厂,都会问能力验证这块。如果有并且获得满意结果,回答时的底气都足些。
好了,今天的分享就到这里,欢迎小伙伴们踊跃投稿,分享自己在检测过程中的经验。
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