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实验室做标准曲线,这15个问题必须要注意!

   2021-04-12 585
核心提示:1.仪器一定要校验好。这个不用说为什么了。2.移取液体体积要精确,保证迅速准确,尽可能用一根移液管;为减少人为误差,同一种液
 1.仪器一定要校验好。这个不用说为什么了。


2.移取液体体积要精确,保证迅速准确,尽可能用一根移液管;为减少人为误差,同一种液体要一个人操作。


3.保证标准品的纯度,所用标准品最好是新打开的,纯度较高的固体或溶液,防止污染。


4.容器要保证洁净。容器保持清洁有时甚至比其他方面更重要,千万不要忽略。

 

5.根据标准品理化性质注意加样的先后顺序。



6.如果要测OD值,应保证测前各管液体充分混匀。


7.若多次测试,有某个点误差较大,应舍弃。


8.样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。

 

9.并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈s型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段,即曲线几乎成直线的范围内。


10.最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。


 



11.检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。


12.标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。


13.做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数r至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。


14.标准曲线需要人为的增加(0,0)点吗?

 

不能增加。通常的标准系列多是配制0,1,2,3mg/L系列这样的说法,没做实验人为添加(0,0)很不妥,因为很多时候0管进入仪器可能也有响应值,这也是我们考察试剂空白的一个重要步骤。这个0管在某些时候非常重要,如,全血铅测定,我们采用牛血清来基体匹配标准系列,如果此时你用酸做空白或没做实验人为添加(0,0),那你就很难做好标准曲线,所以,标准曲线的0管也是做好标准曲线的重要考虑点。


15.标准曲线需要减掉试剂空白来做吗?

 

不需要。仪器测出来标准系列的响应值可以减掉试剂空白或减掉0管的响应值来做,工作中我们也常用0管来做仪器调零。其实没有必要那么麻烦,即使空白或0管有响应值,在构建标准曲线时,我们已经认为该响应值就是0浓度,也就是扣除了这个空白的。

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标签: 标准
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