食品微生物实验室技能提升答疑系列之三：微生物样品采集与处理篇
2021-02-22
食品微生物检验公众号346核心提示：微生物样品采集与处理专题课后答疑来喽，大家快来学习！学习！学习！1.遇到发现霉斑的预包装食品还能继续检验吗？答：要看委托方
微生物样品采集与处理专题课后答疑来喽，大家快来学习！学习！学习！
答：要看委托方的需求，因为霉斑的预包装食品已经感官判断不合格，如果要求继续检验那就继续检验。
2. 老师 想请教一下微生物可以将样品混合后测试 在中国的哪个标准里有这样 的字眼 谢谢
3. 蛋糕房的食品有包装，有净含量标签等标注，但是不密封（例如油纸包装，塑料袋装，用胶带封口等吐司、面包）。能否按29921 判定。
4. 网兜装粽子，是否需要无菌采样，是否能按29921判？
5. 4789.38大肠埃希氏菌平板计数法按照国标先倾注VRBA,再覆盖VRBA-MUG的方法做不出来，请问老师第二法是怎么做的？？
答：方法有缺陷，建议用VRBA+VRBA-MUG的琼脂倾注，凝固后再覆盖一层
6. 冰块应该称取还是融化后吸取，单位应是ml还是g？
答：半冷冻的食品标准要求在45℃水浴里不超过15min化冻，然后再混匀检测。冰块的微生物分布也是不均匀的不能称重取样，还是要融化后取样。因为水的密度是1，单位是mL和g都是一样的。
答：样品不均匀，检测的开始时间不一样，微生物检验受化验员的主观因素影响还是挺大的，不同的实验室不同的化验员检测结果差距是有差距的。
8. 30L的桶装扎啤，n=5，取样需要专门的工具，用皮管通出，一般就配套一个工具，怎么取样？
答：不需要皮管导出，一根皮管没法消毒；桶装扎啤摇匀，然后消毒扎啤出口，直接放到5个灭菌的容器里就可以了。
9. 像糕点类的样品，需要在不同部位取样，最后是混合检测吗？
答：要看标准，糕点类，如果是霉菌，那就需要不同部位取样混合检验；如果是大肠和菌落总数检测要n=5，来取样。
11. 老师，微生物不能复检能复验吗？微生物的复检和复验怎么区分？如果出现不合格，最规范的流程是什么？
答：首先，复检、复验、复测、再做一次都是一样的，不得复检就是不得复检。最规范的流程是，如果出现不合格，自己认真核查一次自己内部的实验室质量控制措施有没有都做到位了，如果都做到位了，那就报告不合格就可以了。
12. 商业无菌领样时，发现有腐败异味等，怎么办？
答：这个结果是异常的，因为商业无菌是密封的状态，怎们可能是有腐败异味的状态。如果你拿到的罐头已经有腐败异味，就表示已经泄露了，不是商业无菌的状态。
13. 半固体酸奶的大肠菌群标准是n=5,c=1,m=1,M=5,如何取样？
答：9306国标制定的有问题，已经在修改了。就目前的操作来讲，有人建议是1:10稀释后吸取1mL样液加入10个平皿里来做；个人建议只有1:10的稀释液取10mL稀释液放到15cm的平皿里面倾注平皿来做。
14. 某些样品比如米粉或增稠剂之类，加稀释液均质以后均质袋里没有液体，吸不上来应该怎么处理呢老师？核桃，开心果之类取样需要去皮吗？
答：再加稀释液，（比如1:20、1:30的稀释）直到可以吸出液体，这时可能灵敏度不够了，那就取10mL稀释液放到15cm的平皿里面倾注平皿来做
答：鸡爪直接用旋转均质器来均质粉碎，瓜子也是直接粉碎。
17. 检验调味品的高盐需要用无菌水来稀释，高盐和低盐如何判定？
18. 方便面，包含粉包和料包，制样方法具体是什么？有没有相关依据？
答：把所有的粉包和料包挤到面块上来制样，进行检查。按国标规定的操作。
19. 检测PH4.0的饮料样品原液用不用调pH至中性？
21. 商业无菌和卫生指示菌有相关联吗 ，假如一个样品是商业无菌，卫生指氏菌是10CFU/g,这样的检验结果正常吗？
答：正常，他们既有关联又没有关联，因为商业无菌只是在厌氧的状态下不能繁殖微生物，但是你把它放到正常状态下它是可以生长繁殖的。
22. 老师，固体样品均质后，吸取 样品时取上清液还是带入一些固体沉淀？
答：不允许沉淀后取样，为了防止固体沉淀的干扰，可以使用带有滤网的均质袋。
23. 脂肪含量高的加入无菌吐温80 的量是多少？
答：即将公布的4789.17肉与肉制品标准里，吐温80称225mL的稀释液加20g样品均质前要加10mL的吐温80。
24. GB 4789.3中用氢氧化钠调节PH，那做食醋到底该用什么调PH？
答：用 1mol/L的氢氧化钠调节pH也可以，如果感觉要用很多的氢氧化钠的话，你也可以用20-30%的NaCO3来调节pH。
25. 冬季气温低，油脂类样品取样时为固态，直接固态检验还是等融化后检验？
答：现在是融化后检验，下一轮油脂类标准里是直接称量固态检验。因为即使是融化的状态下，油脂类也是非常的粘稠，用吸管吸样品是吸不准的。直接称固态比较好，称取后加到预热到40℃的稀释液里进行均质处理。
26. 预包装产品不分装还需要无菌取样吗？预包装产品进实验室后必须马上检验吗？盒装的酸奶称样按照mL还是g?
答：预包装产品直接取样就可以，预包装产品进实验室后要看它的保存条件，如果是冷冻、冷藏食品当然要尽快检验；常温保存的样品问题不大；盒装的酸奶，个人建议称重取样，因为它的粘度大于牛奶。
27. 独立包装标称45g的糕点可以同时做菌总、大肠、沙门、金葡、霉菌的项目？350mL独立包装的纯净水可以做铜绿（两个平行板量不够）么？
答：可以，为啥只取45g,多取几包样品制样.菌总、大肠、金葡、霉菌可以用一份样品，称取25g样品加225mL的稀释液均质后直接用；沙门需要单独用一份样品；350mL独立包装的纯净水可以做铜绿的，没有规定要做两个平行的滤膜的。
28. 狗粮磨牙棒的检测也可以按照食品标准检测吗？样品比较坚硬，打磨不了。
答：可以按照食品标准检测，但是需要跟客户沟通。因为宠物食品有宠物食品的国家标准。客户要求用食品标准检测的话，狗粮磨牙棒比较硬，你可以隔着包装袋用小锤子把它敲碎，然后用旋转式均质器均质，再进行检验。
29. 大包装液体样品（例如1吨）开封检验后可能长时间不用，怎样安排取样合适？
答：根据实际的生产需要、供应商的合同规定，如果规定验收后给钱，那就开封验收；如果不着急，那就临用前再开封验收。
30. 老师，关于沙门GB要求n=5，我们可以做混合样么，还是必须要25g单独分析。因为我们也要遵循企业标准需要n=8，我们分析每4个一混合做俩样，或者n=15每5个一混合样做3个样，符合GB要求么？
答：如果c=0,混合样做可以；4个一混合做俩样也是可以的，在做捡样的时候就相当于100g样品，这时所要加的增菌液（缓冲蛋白胨水）也要按四的倍数添加。
答：再制蛋的商业无菌跟普通的样品（火腿肠、午餐肉）一样，没区别。直接培养、感官、取样加蒸馏水均质然后商业无菌，然后再取涂抹液来做单染色。
32. 有些粉末样品加稀释液混匀后很快就沉淀分层了，做总数的话应该吸取清液还是底部样品呢？
答：不允许分层沉淀后取样，因为沉淀后粉末会吸去很多细胞，微生物分布不均匀，所以粉末样品均质后要立即取样。
